肝癌细胞同步化及其与胞外基质的粘附特性初探

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恶性肿瘤是一类严重威胁人类健康和生命的疾病,其基本特征就是癌细胞失控的增殖、侵袭和转移。现代细胞生物学、分子生物学、免疫学的长足进步使得对癌细胞侵袭和转移机理的认识有了很大提高。但是,对于癌细胞侵袭转移所涉及到细胞流变学特性的研究还做得不够深入。因此本文从不同角度对癌细胞本身特性及其行为进行研究和比较,对于阐明癌细胞侵袭和转移的机制以及防治,都具有理论和实际应用的意义。本文的主要研究内容和结果如下:(1)论证了细胞周期同步化方法的可行性。采用以胸腺嘧啶核苷阻断后释放,进而以秋水仙碱阻断后释放培养的办法获得同步于G1期细胞,并保证了在实验要求的时段内的同步率对于HCC基本稳定在60%以上,对于CBRH7919基本稳定在55%以上;采取以胸腺嘧啶核苷双阻断法获得同步于S期细胞,并保证了在实验时段内的同步率对于HCC和CBRH7919基本稳定在95%以上。(2)应用微管吸吮技术对于CBRH7919细胞与胶原I的粘附特性进行了研究。并分别从与胶原I粘附的浓度、时间以及同步化处理CBRH7919细胞与胶原I的粘附作用进行了考察。实验表明CBRH7919与胶原I粘附具有浓度依赖性,且粘附力在检测时间内随时间延长而增大,但后期增长幅度不大。从周期角度看,G1期粘附力较S期大,反映了G1期具有较高的转移潜能。(3)对于HCC细胞进行了与胞外基质胶原IV的粘附性实验,结果表明:HCC细胞对于胶原IV的粘附具有浓度和时间依赖性。HCC细胞在较高浓度有趋近饱和的粘附力数值,且在初期粘附行为极不稳定。同步化处理后S期HCC细胞与胶原IV的粘附力较G1期小,分析这可能与G1期有较活跃的胞质化学反应相关联。(4)对近年来我院应用微管吸吮技术进行的癌细胞与胞外基质的粘附行为研究结果进行了分析和比较。结果表明就已进行的肺癌、肝癌实验而言它们都具有浓度依赖性,即使不同种属的癌细胞也反映了这一事实。它反映胶原作为胞外基质主要成分对于癌细胞粘附的重要性,即胶原既是癌细胞侵袭的屏障,又是其移动的支撑点。
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