荧光反猝灭法在药物分析中的应用研究

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本文综述了荧光分析法在药物分析中的应用情况,并在前人工作的基础上,利用药物分子富含质子化叔胺离子以及N原子的特点,将含有质子化叔胺离子的药物分子与荧光猝灭体系中的荧光猝灭剂缔合,使荧光物质释放出来,溶液重新发出荧光。或者利用含N药物分子中N原子的孤对电子破坏荧光猝灭体系的电子分布结构,阻止荧光猝灭发生而使溶液重新发出荧光。本文我们研究创建了两种荧光反猝灭体系,并发现反猝灭后溶液重新发出的荧光强度与药物浓度成正比关系,据此我们建立了一系列荧光反猝灭法测定药物含量的新方法,并将其用于实际样品分析。同时,对其反应机理进行了一些探讨。具体内容如下:1.四苯硼钠对罗丹明B具有荧光猝火作用,使其荧光信号强度减弱甚至消失,而盐酸西替利嗪能与四苯硼钠反应生成更稳定的疏水性离子缔合物,使罗丹明B重新释放出来,溶液的荧光强度增强,且荧光信号的增强程度△F盐酸西替利嗪的浓度成线性关系,据此,建立了一种荧光反猝灭法间接测定盐酸西替利嗪含量的新方法。该方法线性回归方程为△F=O.6389ρCTZ+0.9999(r=0.9964),线性范围为3.50-32.3mg-L-1,检出限为1.05mg·L-1,方法RSD为1.29%。用该方法对市售盐酸西替利嗪片及盐酸西替利嗪胶囊进行测定,测定值与药品标示值基本相符,加标回收率在90.3-106%之间。2.利用K+与四苯硼钠反应生成更稳定的离子缔合物沉淀,K+对罗丹明B-四苯硼钠荧光猝灭体系具有反猝灭作用。在pH为6.0的罗丹明B-四苯硼钠荧光猝灭体系中,加入一定量的K+后,体系荧光强度增强。以375nm作为激发波长,640nm作为发射波长,测定试液的荧光强度F1。在相同的条件下,测定试剂空白液的荧光强度F0。实验发现,两者的荧光强度之差ΔF(ΔF=F1-F0)随K+含量的增大而线性增加。据此,我们建立了一个简便灵敏的K+测定新方法。在优化的条件下,线性范围为2.14-43.0mg·L-1,测定的检出限为0.642mg-L-’,相对标准偏差为1.32%。方法选择性好,可用于浓盐体系中微量K+的测定。用该方法对不同厂家、不同种类食盐、复方氯化钠注射液中钾离子含量进行了测定,回收率在95.4-105%之间,与国家标准方法重量法相比较,结果一致,但本方法操作更简便,快速。同时,解决了原子光谱法测定同类样品时基体元素的干扰问题,3.盐酸文拉法辛对罗丹明B-四苯硼钠荧光猝灭体系也有反猝灭作用,主要是由于盐酸文拉法辛分子中的质予化叔胺离子能与四苯硼钠发生缔合作用,使体系中的荧光物质-罗丹明B释放出来,溶液的荧光强度增强,且增强程度△F盐酸文拉法辛的浓度成正比关系。据此建立了罗丹明B-四苯硼钠体系荧光反猝灭法测定盐酸文拉法辛的新方法。溶液中盐酸文拉法辛的质量浓度在2.42-43.9mg·L-1范围内呈良好的线性关系,线性回归方程为△F=0.5206ρVLX+2.4372,相关系数为0.9972,检出限为0.727mg·L-1,方法RSD为0.87%,回收率在94.9-104%之间。本方法具有良好的选择性且不使用任何有毒试剂,应用于实际样品的测定,结果满意。4.氢溴酸加兰他敏是一种治疗中轻度老年痴呆症的新型药物,其分子结构中含有质子化叔胺离子,可与四苯硼钠反应生成电中性离子缔合物。在罗丹明B-四苯硼钠荧光猝灭体系中加入氢溴酸加兰他敏后,可使罗丹明B重新释放出来,该体系荧光信号增强,且荧光信号的增强程度与氢溴酸加兰他敏的浓度成线性关系。据此,建立了一种测定氢溴酸加兰他敏含量的新方法。实验结果表明:在优化条件下该方法线性范围为4.63-64.5mg·L-1,检出限为1.39mg·L-1,方法精密度为1.82%。用本方法对同一厂家生产的不同批号的氢溴酸加兰他敏注射液进行测定,结果与注射液标示量符合。同时,进行加标回收试验,其回收率在95.1-103%之间。5.研究发现在pH为6.8的溶液中,茜素红与吖啶橙之间能发生有效的能量转移,使吖啶橙荧光猝灭,此时加入适量的盐酸文拉法辛,盐酸文拉法辛在近中性条件下被中和成文拉法辛,其分子的N上含有孤对电子,可作为电子给予体,与电子接受体-茜素红发生荷移反应,阻抑茜素红-吖啶橙之间的能量转移,又使该体系的荧光强度增强,且荧光信号的增强程度与盐酸文拉法辛的加入量成良好的线性关系。据此建立了吖啶橙-茜素红体系荧光反猝灭法测定盐酸文拉法辛含量的新方法。实验结果表明该方法在优化条件下,线性范围为3.49-31.4mg-L-’,检出限为1.65mg-L-’,方法精密度为1.16%。该方法用于市售盐酸文拉法辛缓释片及盐酸文拉法辛胶囊含量的测定,其回收率在95.5-105%之间。
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