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性激素(包括雄激素和雌激素)参与成年动物垂体激素分泌和中枢神经系统的发育和功能调节。但是,性激素对胚胎发育过程中外周神经和内分泌系统的调节功能和相关的作用机理尚不清楚。本研究通过体内实验、体外实验研究了性激素对鸡胚垂体细胞和鸡胚外周神经元的增殖、分化的调节功能,通过在体注射性激素受体的特异抑制剂来研究性激素对外周神经元作用的相关机理,并通过检测鸡胚和绵羊胚胎垂体发育过程中雌激素受体的变化对雌激素调节内分泌细胞的作用机理进行了比较研究。取得的主要研究结果包括下列几方面: 一、外源雌激素能显著地促进鸡胚早期的细胞增殖和细胞凋亡来影响背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)神经元的发育过程。外源性雄激素能够促进C5DRG和C2DRG的细胞增殖,但抑制其细胞凋亡。雌、雄激素对DRG神经元的发育过程的影响具有剂量依赖性,大剂量的外源激素作用减弱,C5DRG和C2DRG对雌激素的作用表现出不同的敏感性。 二、雌、雄激素受体特异性抑制剂它莫西芬(TAM)和佛他胺(FLU)并不能阻断雌、雄激素对C2和C5DRG细胞增殖和凋亡的影响,而免疫组织化学结果表明雌激素受体、雄激素受体和芳香化酶在C2DRG与C5DRG中并无表达。上述结果说明,雌、雄激素通过非基因组机制来对早期鸡胚C2和C5DRG的细胞增殖和凋亡发挥作用,且雄激素直接作用于DRG细胞,而并非转化为雌激素再发挥其作用。 三、鸡胚发育过程中其腺垂体一直存在细胞增殖,随着胚胎发育进程,增殖细胞细胞阳性比率逐渐下降,至新生鸡下降至22%。鸡胚腺垂体中增殖细胞的分布并无明显的区域性。在成年鸡垂体中存在大量增殖细胞,且主要分布于腺垂体远侧部前叶,双标记方法证明,增殖细胞主要为催乳素细胞中。一定剂量E2处理早期鸡胚后,鸡胚拉特克氏囊(RP)中有丝分裂细胞及S期细胞数目明显增加。10nM的外源雌激素明显促进第10.5天鸡胚垂体细胞增殖。 四、鸡胚发育至第6.5天时,仅在RP腹侧有少量雌激素受体α(ERα)阳性细胞。随着胚胎发育的进程,ERα阳性细胞比率逐渐升高,并分布于整个腺垂体,但在远侧部后叶分布多于前叶。免疫组织化学双标记的结果证明,ERα在垂体中所表达的细胞类型主要是合成黄体生成素(LH)的促性腺激素细胞,其细胞比率随发育进程逐渐升高,在出壳鸡垂体中达到了57%。另在鸡胚发育后期有少量促甲状腺激素(TSH)细胞和催乳素(PRL)细胞也表达ERα。但整个鸡胚垂体发育过程中生长激素(GH)细胞和促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞中并未检测到ERα的表达。外源雌激素能够促进鸡胚垂体ERα的发生。在成年鸡垂体中约24%的细胞表达ERα,雌雄个体间并无明显差异。免疫组织化学双标记的结果证明,ERα在成年鸡垂体中所表达的细胞类型主要是LH细胞,而产蛋母鸡中双标记细胞显著高于成年公鸡。成年鸡垂体中的其他激素细胞中并不表达ERα。AR与垂体激素免疫双标记结果证明PRL细胞和GH细胞均不表达AR,AR主要存在于LH细胞、TSH细胞和ACTH细胞中。ERα与AR的双标记结果证明二者并不在同一细胞中表达。 五、胎羊垂体中ERα的表达变化规律与鸡胚垂体中ERα的变化规律相似,不同发育时期胎羊垂体中几乎所有的ERα阳性细胞均表达Islet-1,提示绵羊胎儿垂体中Islet-1可能参与调节ERα的发生和表达,Islet-1可能通过与ERα共同作用来调节促性腺激素细胞和促甲状腺激素细胞的增