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前言 机体的免疫系统不是孤立地存在和行使其功能,而是与神经和内分泌系统紧密地联系在一起,在通过特定的免疫机制调节内环境稳定的细胞上同时也表达有对神经和内分泌系统调节起作用的分子受体,以至于有现代的神经免疫内分泌学概念。因此,神经和内分泌系统受到外界干扰发生变化不可避免地影响免疫系统功能,尤其是敏感的特异性免疫系统。 围手术期间紧张、焦虑、药物、手术创伤、麻醉等因素对人体免疫系统的干扰在引起感染率增加,肿瘤复发等方面已经受到人们重视。目前的研究多集中在观察不同的麻醉方法对减轻手术应激引起的免疫抑制的作用等方面,而对于硬膜外阻滞本身在无手术应激的情况下对机体免疫系统的影响报道很少。 目的 观察在无手术应激的情况下应用罗哌卡因硬膜外阻滞对机体T淋巴细胞亚群、NK(natural killer)细胞及血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的影响。 材料与方法 选择需要硬膜外麻醉下行膀胱及下肢手术的患者45例,随机分为三组:H组,高浓度局麻药(1.0%罗哌卡因)组;L组,低浓度局麻药(0.5%罗哌卡因)组;N组,对照组,只给以试验剂量和相同容量的生理盐水。三组病例于进入手术室前30分钟肌注咪唑安定50μg/kg、阿托品10μg/kg。入室后连接监护仪连续监测ECG刀R小PJPO卜建立静脉通路。左侧卧位下选择LZ-n间隙直人法行硬膜外穿刺,成功后放置连续硬膜外导管,仰卧位。诱导前给予试验剂量 1.0%利多卡因 SInl,如无人血及脊麻症状则 3分钟后分两次间隔5分钟按分组情况给予规定浓度罗版卡因或生理盐水20rnl,每3分钟用针刺法测定阻滞平面直到痛觉平面稳定,阻滞平面上界h-T10,下界S3-SS。严重低血压给予麻黄碱10-15mg,心动过缓给予阿托品0.3-0.sing。三组病例均在给予试验量前(阻滞前,T;人阻滞平面稳定(对照组根据预实验取平均值 13.5。4.smin)后(阻滞后)30、60、90分钟门1、LL)取外周静脉血各两份:一份1.srnl,EDTA抗凝;一份4Inl,3000转/分离心5分钟后取血清Zml,置于一80t低温冰箱中保存待测。 T细胞亚群【CD了CDI、CDJ、(CDI+CDI)/(CDI+CDJ)及*K细胞(6D6巧*的测量:用清洁微吸头取**TA抗凝血100UI小心加人标记好的各装有 20 pl双色直标免疫荧光试剂门IMK-LymPhocyte)的试管底部,混合反应 30分钟,然后每个试管再加人IX浓度的溶血剂ZInl混匀放置暗处12分钟(不能超过12分钟X鞘液洗涤后 2500转/分离心 10分钟,去上清后加人 0.Sllil固定液问.0%多聚甲醛)充分混匀2-8℃放置暗处待上机测定。 免疫球蛋白测定:()标准曲线的制备:将标有lgG*gA*gM含量的工作标准先用0.snd蒸馏水溶解,再用生理盐水稀释成五种浓度的标准液。制备IgG*gA标准曲线取以上各浓度标准液10 ul,制备 IgM取 20 tri分别加人各单扩板前五孔,置水平湿盒放37 t恒温培养箱内,48小时后观察结果,用卡尺测量扩散环的直径。纵轴为Ig含量乘以4,横轴为扩散环的直径,将五点连线即为标准曲线。p)样品测定:取待测血清 0.IM加 0.3all生理盐水混匀,测 IgG*gA脚 10gi,测 IgM取20gi分别注人各自单扩散板孔中,置水平湿盒放37℃恒温培养箱内,48小时后用卡尺测量扩散环的直径,即可从所对应标准曲线中查出的格的含量。 ·2· 统计学分析:所有数据用均数。标准差表示,组内比较采用配对 t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05认为有显著性差异。 结 果 T细胞亚群的变化心组在阻滞后 Ti丁。时点与*比较,CD;和(C叮十C叮)/(C比十C几’)值显著升高(P<0.05),阻滞后*时点与L相比无显著变化河>0.05人人组在阻滞后各时点变化趋势与H组相同,但与阻滞前比较无显著差异(P>0.05入中组和L组比较阻滞后各时点变化值均无显著差异(P>O.05h出组和L组CD入CDS十在阻滞前后无显著变化州组T细胞亚群在”阻滞”前后均无显著变化K>O.05入*K细胞的变化心组和L组在阻滞后L、L时点与兀比较,*K细胞显著降低(P<o.05人阻滞后L时点与L相比无显著变化(P>O.05X对组阻滞后各时点均无显著变化(P>o.05厂出组和L组与N组比较,阻滞后L人时点差异显著(P<O.05人阻滞后L时点无显著差异沙>0.05人免疫球蛋白 IgG*gA*gM的变化:三组病例在阻滞后各时点 IgG。lgAkM均无显著变化河>0刀5人 全 论 无手术应激的情况下应用罗所卡因硬膜外阻滞对机体的细胞免疫功能产生轻微的、一过性的。可逆的抑制作用,对体液免疫功能无抑制作用。在临床应用的罗听卡因浓度范围内这种影响与浓度和剂量(浓度X容量)无关。