目的：在中医药理论的指导下,综合采用TLC、IR、HPLC、DNA barcoding等现代分析技术对延胡索及其伪品进行研究,建立专属性强、可适用于不同需求的延胡索真伪鉴别方法。方法：1.采用薄层色谱发对延胡索正品及伪品进行鉴别研究,对《中国药典》延胡索项下薄层色谱条件进行优化,增加特异性对照品,使方法更加适用于延胡索和伪品的鉴别。2.采用红外光谱法对延胡索进行指纹图谱研究,并对39批样品的红外光谱进行相似度分析,再结合聚类分析的方法,进行真伪鉴别。3.采用高效液相指纹图谱法对延胡索及其伪品进行研究,对39批样品的高效液相色谱指纹图谱相似度进行比较,从而区分出正伪品。4.采用DNA分子生物学方法,分析比较不同序列的鉴别效率,确定延胡索DNA条形码。在分子研究的基础上,分析并设计特征引物,并利用此引物应用位点特异性PCR的方法,完成鉴别。结果：1.在《中国药典》延胡索TLC鉴别方法的基础上,优化了其薄层色谱鉴别方法,增加了四氢黄连碱和紫堇碱两个特征的对照品,提高了色谱的专属性。2.采用粉末直接压片,测定红外光谱,以其中26批延胡索正品的红外光谱图建立了延胡索红外光谱平均图谱,通过对图谱的整体特征的对比,正品红外光谱与平均光谱的相似度大部分大于0.9,伪品的相似度则全部低于0.9。结合聚类分析的方法进行分析,延胡索正品伪品的红外光谱能够被成功的区分。达到快速有效鉴别的目的。3.建立了延胡索HPLC指纹图谱,以样品中26批正品延胡索建立了HPLC指纹图谱共有模式,确定了17个共有峰,指认出3、7、8、9、12、13、14、15号峰分别为原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素、四氢小檗碱、紫堇碱、脱氢海罂粟碱。39批样品图谱相似度计算可得出,26批延胡索正品的相似度在0.90以上,13批伪品的相似度均在0.85以下。4.确定了延胡索4个DNA片段的PCR条件,并通过遗传距离检验、barcoding gap检验、建树法等方法分析评价各片段的鉴定效率,确定ITS2序列能够成功区分延胡索及各种伪品,可作为延胡索的DNA条形码。5.对比正伪品的ITS2序列,寻找出差异位点,设计了一对特异引物,建立了延胡索位点特异性PCR方法。通过利用特异引物进行PCR检测,可成功对延胡索的正伪品进行区分,可达到快速、专属鉴别延胡索的目的。结论：本研究通过对延胡索及其伪品的薄层色谱、红外光谱、高效液相色谱指纹图谱、DNA条形码等内容进行研究,建立了多样化的延胡索鉴别方法,为延胡索的质量控制提供更加全面的标准,为市场监控和用药安全提供了实验依据,为进一步规范延胡索的应用开发提供参考。