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目的：验证miR-23a对DAPK1的调控关系以及miR-23a/DAPK1参与肝分子水平探讨德都红花七味丸诱导人肝癌细胞HepG2及肝癌小鼠癌细胞凋亡，明确蒙药作用下肝癌增殖、迁移、转移的机制，为其在肝癌治疗中的广泛应用提供实验基础和理论支持。 方法：第一部分，计算给药区间，制备德都红花七味丸高剂量组、中剂量组，低剂量组，生理盐水组(0.01ml/g生理盐水)。常规培养肝癌HepG2细胞，加药后进行MTT实验检测德都红花七味丸高、中、低剂量组对HepG2细胞增殖能力的影响，划痕实验检测细胞迁移能力，流式细胞仪检测德都红花七味丸对HepG2细胞周期的影响。第二部分，基因芯片分析蒙药组与对照组表达差异的mi RNA，qPCR验证芯片分析结果。荧光实时定量PCR检测德都红花七味丸作用下DAPK1基因m RNA的表达，Western blot法检测德都红花七味丸作用下DAPK1基因蛋白的表达，最后双荧光素酶报告基因实验进一步检测miR-23a与DAPK1之间的靶向调控关系。 结果：MTT实验结果显示，在向肝癌细胞株HepG2加药后可明显降低细胞增殖率，中剂量含药血清的效果最好，差异有统计学意义。蒙药组与对照组比较，48小时后对照组相对蒙药组划痕距离显著缩短，蒙药组并没有显著变化，表明蒙药组对肝癌HepG2细胞的迁移能力的降低有显著作用。流式细胞检测细胞周期证明，细胞出现G0/G1期向S期转变的阻滞，更多的细胞停留于G0/G1期，提示蒙药德都红花七味丸含药血清对HepG2细胞的抑制作用主要发生在G0/G1期。通过芯片检测已经证实，在蒙药组中差异表达的mi RNA，并通过q-PCR证实，其结果和芯片分析的结果一致，在蒙药组与对照组中，miR-23a的表达具有明显差异。采用Target Scan、Pic Tar、mi Randa等软件对miR-23a的靶基因进行查询预测，并在其他多个生物信息工具中进行验证，最终选定miR-23a可能靶向结合DAPK1。荧光实时定量PCR检测DAPK1基因mRNA的表达，我们发现蒙药组中DAPK1的相对表达量显著高于肝癌组（p＜0.05），由此可见蒙药组可以从mRNA水平增加DAPK1的表达。Western blot法检测DAPK1基因蛋白的表达水平，结果发现，蒙药组中DAPK1的表达量显著高于对照组（p＜0.01）。 结果：同PCR的结果一致，说明德都红花七味丸可以促进DAPK1的表达。我们应用双荧光素酶报告基因系统，进一步验证DAPK1是否是直接作用的靶基因。 结果显示miR-23amimics与pmirGLO-DAPK1-3’UTR共转染组的荧光素酶信号与其他组相比荧光信号下降约80%（p＜0.05）。而对于突变体pmirGLO-DAPK1mut-3’UTR来说，无论miR-23a的表达高低，荧光素酶的信号无明显下降，各组间无明显差异（p＜0.05）。上述结果表明，miR-23a可以特异性直接靶向作用于DAPK1。 结论：德都红花七味丸对降低肝癌HepG2细胞的迁移能力有显著作用，并能够有效降低分裂期细胞数量，出现了G0/G1期向S期转变的阻滞，从而抑制癌细胞的发生、发展速度。德都红花七味丸可以抑制miR-23a的表达从而促进DAPK1的表达。miR-23a可以特异性直接靶向作用于DAPK1。