中药的浊点萃取—液相色谱分析方法研究

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浊点萃取法(cloud point extraction, CPE)是近年来发展起来的一种新型的液一液萃取技术,它利用表面活性剂溶液的增溶和浊点现象实现溶质的分离和富集。与传统的溶剂萃取过程相比,浊点萃取法不需要大量的有机溶剂,易于操作,对环境的影响较小,能够保护被萃取物的原有性质。本论文将浊点萃取法应用于中药活性成分的萃取和浓缩,建立了中药大黄和秦皮中多种活性成分的浊点萃取-液相色谱检测方法。对影响表面活性剂溶液浊点和相比的各种因素进行了研究。同时在对秦皮的研究中发现了秦皮甲素和秦皮乙素的转化现象,对其转化的影响因素进行了初步探讨。全文共分5章:第1章在参考145篇文献的基础上综述了浊点萃取法的理论基础及其应用研究现状。理论方面主要从浊点萃取法的基本原理及浊点相图出发,讨论了实验条件的优化;应用方面主要总结了该方法在萃取金属离子、生物大分子和有机小分子方面的研究现状。第2章对非离子型表面活性剂Genapol X-080的浊点及相比的影响因素进行了研究。考察了表面活性剂浓度及盐浓度对浊点温度的影响;并详细研究了表面活性剂浓度、盐浓度、平衡时间和平衡温度对相比的影响。第3章利用非离子型表面活性剂Genapol X-080胶束水溶液萃取富集了大黄生药材中五种蒽醌类化合物,并用高效液相色谱法测定了其含量。考察了表面活性剂浓度、大黄粉末的粒度、超声萃取时间、液固比和溶液的酸度对萃取效率的影响。对加盐量、平衡温度、平衡时间等影响浓缩效果的实验条件进行了优化。第4章利用非离子型表面活性剂Genapol X-080萃取富集了秦皮中两种疏水性较弱的香豆素类化合物:秦皮甲素和秦皮乙素,从而考察了浊点萃取法对疏水性不同物质的萃取富集效果。并对其实验条件进行了优化。通过和2005年药典中秦皮提取剂甲醇进行对比,得到相当甚至高于甲醇的萃取效果。第5章用高效液相色谱法对秦皮提取液中的物质转化现象进行了研究,考察了提取溶剂、酸度、处理温度及贮存方式等因素对秦皮提取液中物质转化的影响。实验结果表明:溶液酸度较高时,经高温加热,在密闭条件下贮存,可有效抑制其物质转化;从而推断秦皮甲素向秦皮乙素转化机理可能主要为水解酶酶解过程。
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