附红细胞体病(Eperythrozoonosis)是广泛存在于人和动物体内的一种人畜共患病，己对养殖业和人类健康造成巨大威胁。猪附红细胞体病是由猪附红细胞体附着在红细胞上或者寄生于血浆中而引起。主要表现为急性型高热、黄疸、贫血等症状；慢性感染引起动物生长缓慢和母猪的繁殖障碍。所以对该病的研究就显得十分重要。本研究对猪附红细胞体的病原形态、生物学特性以及体外培养方法进行了初步的探索，并建立了特异性强、敏感性高的PCR快速诊断方法。　　 目前，学者对猪附红细胞体的形态结构和生物学特性尚有很多争议。为确定病原，本试验采用鲜血压片镜检，血液涂片染色镜检和扫描电镜观察等方法对该病原进行研究。观察到的猪附红细胞体以圆形和短杆状为主；吉姆萨染色呈蓝紫色，有折光性；扫描电镜显示寄生在红细胞变形后的毛刺顶端，推测其可能是以出芽方式繁殖。这与其他学者的报道基本一致。　　 根据GenBank上已报道的猪附红细胞体16S rRNA的序列设计一对特异性引物，进行PCR扩增并将产物克隆到T—vector后测序。结果表明扩增到的目的基因片段为404 bp，与GenBank上坳coplasma suis序列同源性为97％。试验建立的PCR诊断方法特异性强，与健康猪血液、猪链球菌、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、弓形虫、猪圆环病毒DNA无交叉反应，能检测出的最低DNA浓度是8.6fg/μl。PCR诊断方法的敏感性、特异性和诊断率均为100％，明显优于血液涂片染色镜检方法。应用该方法对浙江部分地区猪附红细胞体病进行流行病学调查显示：检测样品80份，其中阳性8份，感染率为10％。该方法具有快速、准确、敏感等特点，适合于猪附红细胞体病的早期诊断，同时也为猪附红细胞体病分子流行病学的调查提供技术支撑。　　 为建立简单稳定、成本低的猪附红细胞体体外培养方法，本试验在前人报道的方法基础上加以改进。取96孔培养板每孔加入170μl完全培养液，25μl经PBS洗涤后备用的正常猪红细胞泥和5μl感染附红细胞体的红细胞泥，使每孔的总体积保持在200μl。从RPMI—1640、M—199、D—MEM中筛选出效果最好的基础培养基；在筛选出的基础培养基中分别添加20％、30％、40％的猪血清筛选出培养效果最好的血清浓度。结果表明：以RPMI—1640基础培养基中添加40％的猪血清，在37℃5％CO2环境下体外培养效果最好。体外培养方法的建立为筛选猪附红细胞体有效药物提供载体，也为研究猪附红细胞体的代谢过程、生物学特性及疫苗的研制奠定基础。