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骨髓增生异常综合征(MDS)是一种造血系统的恶性克隆性疾病，以全血细胞减少，骨髓病态造血和向白血病进展的高风险为特征。常规细胞遗传学(conventional cytogenetics，CC)研究显示，约40％～70％的患者具有非随机的克隆性核型异常，其中以-5／5q-、-7／7q-、+8、20q-异常最为多见。MDS国际预后积分系统(IPSS)将核型和细胞减少的系列数目、原始细胞百分比一起列为评价MDS预后的主要危险因素。2000年世界卫生组织(WHO)提出的MDS分型建议中也已将染色体列为必须检测的重要诊断指标之一。因此，染色体核型分析对于MDS的诊断、鉴别诊断、预后判断和克隆消长的监测等具有十分重要的意义。但CC只能分析中期细胞，并受分裂相数量和质量的影响，因而可能导致核型分析失败或漏检伴有染色体畸变的小克隆。荧光原位杂交(nuorescence in situ hybridization，FISH)是指以核酸序列特异性探针标以不同的荧光素与经变性处理的靶细胞DNA进行杂交。它是近年来发展起来的基于细胞遗传学、分子生物学和免疫学基础上的一门新技术，由于其高度敏感性和特异性，已成为另一有力的分子遗传学研究工具，并与常规细胞遗传学技术互相补充，为MDS的诊断、鉴别诊断、预后判断和染色体畸变克隆起源的研究等提供了新的有效手段。 一、单色间期荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征-5／5q-、-7／7q-、+8、20q-染色体异常 我们应用SpectrumRed或SpectrumGreen荧光素直接标记的YAC248F5(5q31)(跨越5号染色体长臂5q31断裂点)、YAC938G5(7q32(跨越7号染色体长臂7q32断裂点)、YAC912C3(20q12)(跨越20 荧光原位杂交（FISH）技术在骨髓增生异常综合征（MDS）中的应用 中文摘要 号染色体长臂20ql2断裂点）等特异性序列DNA探针和8号染色体着 丝粒口卫星DNA探针（CEPS人 分别对48例、48例、52例和67例。M＊S患者的骨髓细胞进行单色间期门SH检测。结果：1．M＊｝5乃今 染色体异常：48例 MDS患者中，间期 FISH检测 13例为阳性，CC检 测其中7例为阳性，6例为阴性。2＊＊巳7门1染色体异常：始例＊＊S 患者中，3例 CC和 FISH检测均发现刁汀q一 45例 CC检测无刁门q－异 常，nSH却检出6例有7十异常。3．MD S 20十染色体异常：52例＊＊S 患者中，CC检测为20q－的4例患者均得至u FISH的证实；48例CC检 测无 20q－的患者中，FISH检出 3例有 20q－异常。4．MDS＋8染色体异 常：67例 MDS患者中，CC检出的 15例＋8患者均得到 FISH的证实； 52例CC检测无＋8的患者中，FISH检测8例有＋8存在。结论：单色 间期FISH是检狈MDS患者－5／5q一、－7／7q一、＋8、20q－等染色体异常的 有力的分子细胞遗传学工具，其敏感性高于CC，是CC的一个重要补 充。 二、双色中期荧光原位杂交技术研究骨髓增生异常综合征涉及1号染 色体长臂的不平衡易位所致衍生染色体着丝粒的组成和来源 MDS 中涉及1 号染色体长臂的重排少见，己报道过的类型有 t（l；7）、t（YI）和X；16）等。我们从1992 年1月～2001 年5月在我院 就诊的MDS患者中发现6例MDS患者为染色体整臂易位，其中 t（h7（qlogho）5例（3例有长期苯接触史），t（1；11）（q12；P13）l例。应用 常规显带技术难以识别以上易位所致衍生染色体的着丝粒由哪条染色 体提供，为了明确易位后衍生染色体着丝粒的组成和来源，我们采用 以 SpectrumRed和 SpectrunGreen两种荧光素分另标记的 1号（红色） 和 7号（绿色）着丝粒口卫星DNA探针，对3例t＊厂）MDS患者进行、双色中期 FISH检测，结果显示：3例 t＊；乃易位的 MDS患者分别可见 27．60、84．0o和 18．5O的中期细胞显示 3个红色荧光杂交信号，2 个绿色荧光杂交信号，其中1个红色和1个绿色荧光杂交信号紧邻在 一起成融合状态，由此证明 t＊；刀易位后 lq与 7p重组形成的衍生染色 体 7p／l的着丝粒由 1号和 7号染色体着丝粒共同组成；另外，我们采 3 荧光原位杂交（FISH）技术在骨回增生异常综合征（MDS）中的应用 中文摘要 用以SpectrulnRd和Spec加mGreen两种荧光素分别标记的1号（红 色）和 11号（绿色）染色体着丝粒口卫星 DNA探针对 1例 t＊；11）易 位的 MDS患者进行双色中期 FISH检测。结果显示：100％的中期细胞 均为2个红色荧光杂交信号和2个绿色荧光杂交信号，无红绿荧光杂 交信号相融合，说明易位后衍生染色体 lq八 的着丝粒不是由 1号和 11号染色体着丝粒共同组成，而是由＊号染色体单独组成。结论：双 色中期FISH可直观而令人信服地证实MDS患者染?