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目的:通过体外培养小鼠足细胞进行实验研究,采用分子生物学研究方法探讨IQGAP1对足细胞细胞骨架重组的调节作用。方法:嘌呤霉素(PAN)诱导的微小病变性肾病动物模型在临床表现和病理改变上与人类相比具有一定的相似性,而微小病变性肾病最具特征性的病理改变就是足突广泛融合,足细胞细胞骨架蛋白的重组在足突融合中起到关键作用。使用PAN50mg刺激小鼠足细胞后,运用实时定量real-timePCR和WesternBlot印迹法分别检测细胞内IQGAP1 mRNA和蛋白表达水平,激光共聚焦显微镜观察足细胞骨架F-actin的分布,F-actin肌动蛋白评分系统(CFS)对骨架重组进行定量分析,并进一步利用质粒转染技术和基因沉默技术分别观察上调和下调足细胞IQGAPI表达后对PAN诱导的足细胞骨架重组的影响。运用SPSS22.5统计软件处理和分析数据,计量资料采用均数土标准差(x±s)表示,参数资料采用单因素方差分析,LSD法进行组间比较,偏相关分析表示两变量之间的相关性,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:重复三次试验,均顺利进行。(1)与对照组相比,PAN刺激组足细胞内IQGAP1 mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05),足细胞F-actin排列紊乱,CFS评分明显升高;(2)IQGAP1 siRNA进一步抑制IQGAP1表达后,PAN引起的上述足细胞F-actin重组更加明显(P<0.05);CFS评分更加升高(3)转染pCantag-myc-IQGAP1质粒促进IQGAP1表达后,PAN诱导的足细胞F-actin排列紊乱显著减轻,CFS评分明显下降(P<0.05)。结论:IQGAP1能抑制嘌呤霉素诱导的足细胞骨架重组,对维持足细胞正常骨架结构起着重要作用。