【摘 要】
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目的：通过观察额尔敦-乌日勒预处理对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠心肌细胞自噬的影响，探讨PI3K-Akt-mTOR信号通路在其中的作用，阐明额尔敦-乌日勒抗心肌MIRI的可能机制。 方
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目的：通过观察额尔敦-乌日勒预处理对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠心肌细胞自噬的影响，探讨PI3K-Akt-mTOR信号通路在其中的作用，阐明额尔敦-乌日勒抗心肌MIRI的可能机制。 方法：将60只健康雄性SD大鼠随机分为6组，每组10只：假手术组、模型组、额尔敦-乌日勒高剂量、额尔敦-乌日勒中剂量、额尔敦-乌日勒低剂量组和复方丹参滴丸组。各组大鼠给药剂量为额尔敦-乌日勒高、中、低剂量组分别1.2、0.6、0.3g/kg，复方丹参滴丸组0.5g/kg，假手术组和模型组给予等体积蒸馏水，各组大鼠给药体积为10ml/kg，每日2次，连续ig给药2周。末次给药12h后，除假手术组只穿线不结扎外，其余各组均采用左冠状动脉前降支结扎法制备在体的MIRI模型，结扎缺血30分钟，松线再灌注120分钟。造模成功后取各组大鼠心肌组织进行检测。主要观测指标如下：1.采用HE染色的方法在光镜下观察心肌组织的病理学变化。2.用免疫组化的方法检测自噬相关蛋白Beclin1和心肌微管相关蛋白轻链3蛋白-Ⅱ（LC3-Ⅱ）的表达。3.采用Western-blot法检测心肌组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的蛋白表达及或磷酸化p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的水平。 结果：1.HE染色结果显示：与模型组比较，各治疗组可不同程度改善大鼠心肌组织的病理形态，其中额尔敦-乌日勒中剂量组可显著改善心肌组织的病理损伤。2.免疫组化结果显示：模型组中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及Beclin1的表达高于假手术组（P＜0.05）；与模型组比较，额尔敦-乌日勒各给药组中LC3-Ⅱ及Beclin1的表达随剂量的增加会有不同程度的下降（P＜0.05）。3.Western-blot分析结果显示：（1）自噬相关蛋白LC3-II及Beclin1的检测：模型组大鼠的LC3-II/LC3-I的比值与Beclin1的相对表达量高于假手术组（P＜0.05），额尔敦-乌日勒高、中剂量组与模型组比较LC3-II/LC3-I的比值和Beclin1表达均降低，差异具有统计学意义（P均＜0.05）。表明额尔敦-乌日勒高、中剂量组能够抑制MIRI的过度自噬。（2）信号通路PI3K-Akt-mTOR的相关蛋白检测：模型组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR的比值与假手术组比较有明显的降低（P＜0.05），与模型组比较，额尔敦-乌日勒各给药组随着剂量的增加p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR的比值出现不同程度的升高。 结论：额尔敦-乌日勒可通过抑制心肌细胞的过度自噬起到对MIRI的保护作用，其保护机制可能是PI3K-Akt-mTOR信号通路通过上调PI3K的表达，进一步上调Akt和mTOR的磷酸化实现的。
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