论文部分内容阅读
宫颈癌是全球女性最重要的恶性肿瘤之一,人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是宫颈癌发生的最主要病因。研究表明,90%以上的宫颈癌样本中可以检测到高危型HPV(high risk HPV,HR-HPV)。目前,国内尚没有全国范围内的HPV流行病学调查,现有的部分地区的HPV流调数据显示HPV的型别分布具有一定的地域和种族依赖性。因此,有必要明确HPV尤其是HR-HPV在国内较大规模人群中的感染状况,从而为HPV的筛查及疫苗选择提供参考。本研究收集了 19,018例中国人民解放军总医院女性门诊病例数据,这些数据包含了宫颈脱落细胞的HPV分型和细胞学检测结果。本研究对该人群HR-HPV的感染率、年龄分布特点、单独感染及其多重感染状况、以及各型别感染在宫颈病变中的比值比(odds ratio,OR)等进行了分析。研究发现:在19,018例样品中,HPV阳性样品为3623例,阳性率为19.1%。在HPV感染阳性样品中,单独感染为2833例,占78.2%,多重感染为790例,占21.8%。在检测的13种HR-HPV中,感染率最高的型别为HPV52,感染率为4.4%,其余依次为HPV16、58、39、51、56、18、59、35、68、31、33 和 45,感染率分别为 3.7%、3.4%、2.7%、2.0%、1.8%、1.3%、1.1%、0.9%、0.9%、0.8%、0.7%和 0.4%。HR-HPV 感染在各年龄层分布不均匀,21-25岁组最高、61岁及以上组最低,21-25岁组和56-60岁组有两个感染高峰;13个HR-HPV中HPV16、39、51、52、56、58、59和68等8个型别的感染在各年龄组中分布具有显著差异,且分布特征不同。在疾病进展相关性方面,根据细胞学检测数据,针对正常、不明确的非典型鳞状上皮(atypical squamous cells of undetermined significance,ASC-US)、低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)和高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)共 4 个分组的分析中发现,在这4个分组中的HR-HPV阳性率分别为16.6%、48.6%、78.5%和78.4%。HR-HPV感染率与疾病进展相关,其中HR-HPV单独感染比率随疾病进展上升,HR-HPV多重感染比率在LSIL组最高,且显著高于其它细胞学分组。此外,进一步的OR值分析表明,HR-HPV单独感染的OR随疾病进展上升,HR-HPV多重感染的OR在LSIL组显著高于ASC-US和HSIL组。另一方面,部分HPV种或型别的单独感染OR大于多重感染,如A9中HPV16的ASC-US组和HSIL组、HPV31的LSIL组,以及HPV33的HSIL组,其余型别可以进行比较的细胞学分组中,多重感染的OR大于单独感染;在不同种HPV组成的双重感染OR比较中,在LSIL组所有双重感染的OR大于单独感染(其中A5+A6和A6+A7组的标本例为1,结果仅作参考),HSIL组A7+A9和A9+A9的双重感染OR大于单独感染的OR。在宫颈癌以及高等级癌前病变中,存在数量较多的HPV阴性样品,其原因尚不明确。在阴性样品中是否存在检测谱以外的HPV型别尚不确定。HPV检测方法主要是基于MY09/11区(包含GP5+/6+和SPF10的扩增区域,位于L1基因区)DNA片段扩增的检测。已有MY09/11检测数据表明,该引物对不同HPV型别检测灵敏度相差可达100倍。近年来下生殖道标本的二代测序的结果中发现了一些较不常见型别HPV的Reads。此外,男性生殖道的HPV感染调查结果中发现了 Alpha属常见HPV型别以外的HPV型别感染,这个结果也侧面支持女性生殖道中存在罕见型别的HPV。本研究将这类不常见的HPV型别称为罕见型HPV,而这些罕见型别HPV在下生殖道中的分布状况则需要进一步的研究结果来确定。基于以上分析,本研究从三个技术路线探讨了样品中罕见型别HPV的分布情况。(1)依据泰国人群和HIV阳性人群中的HPV30的数据,本研究探讨了人群中HPV30的分布情况。(2)在HPV阴性样品中使用MY09/11检测区以外的FAP和SK通用引物PCR产物克隆测序筛选出的10个HPV型别中,挑选了 HPV90和91作为待筛选的罕见型别。(3)对人类微生物组计划(human microbiome project,HMP)中阴道部位标本中HPV的数据再分析,确定待筛选的罕见型别HPV34。最终通过实验将这些罕见型别HPV确认到单个分离株样品。并确认在下生殖道临床样品中HPV30 的阳性率为 0.5%,HPV34 为 0.2%,HPV90 为 0.7%,HPV91 为 0.7%。结论:(1)HR-HPV在医院的机会性筛查人群中有19.1%(3623/19,018)的阳性率,其中78.2%(2833/3623)为单独感染,21.8%(790/3623)为多重感染;HPV感染在不同的年龄组间差异具有统计学意义;HPV多重感染在引起宫颈细胞学异常上可能比单独感染具有更高的危险性。(2)下生殖道中存在HPV30、34、90和91等HPV罕见型别的感染。