【摘 要】
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目的探讨麦角甾苷对大鼠骨髓间充值干细胞增殖和成骨分化的影响及机制。方法密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞并鉴定,细胞随机分为5组,分别以终浓度为0μmol/L(A
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目的探讨麦角甾苷对大鼠骨髓间充值干细胞增殖和成骨分化的影响及机制。方法密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞并鉴定,细胞随机分为5组,分别以终浓度为0μmol/L(A组)、100μmol/L(B组)、50μmol/L(C组)、25μmol/L(D组)的麦角甾苷和成骨诱导液(E组)干预培养。24、48小时及72小时采用CCK-8法检测细胞增殖情况。于干预培养24、48和96小时进行碱性磷酸酶活性检测;72小时进行碱性磷酸酶染色;对细胞进行钙化结节染色。Western blot及Real time-PCR分别检测成骨相关蛋白及基因表达情况。结果(1)CCK-8法检测BMSCs增殖情况:加药干预24和48小时,麦角甾苷对骨髓间充质干细胞增殖情况并无显著影响(P>0.05);加药72小时,B组吸光度值降低(P<0.05)。(2)B、C、D、E四组碱性磷酸酶表达量均较A组有所增高(P<0.05),C组、D组及E组较明显。(3)Western Blot及Realtime-PCR检测结果显示B组、C组、D组及E组BMP2、Smad1、Smad5、Smad8、Runx2、Osteorix成骨相关蛋白及对应基因表达水平均高于A组(P<0.05),而各加药组间差异不明显(P>0.05)。结论麦角甾苷可以诱导BMSCc向成骨细胞分化,可能是通过上调BMP2-SmadsRunx2-Osteorix通路来发挥作用。
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