产后奶牛瘤胃微生物及其代谢物动态变化规律研究

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奶牛分娩后干物质采食量仍处于较低水平,加之泌乳启动,能量摄入小于能量输出,机体易发生能量负平衡(Negative energy balance,NEB),导致奶牛产后代谢紊乱或炎症性疾病发生率增加。奶牛体内约70%的能量由瘤胃微生物发酵饲料产生代谢物供给,微生物区系的改变与NEB以及与NEB相关的产后疾病变化有很大的相关性。因此,本试验探索产后奶牛瘤胃微生物及其代谢物变化规律,以期为产后奶牛NEB和NEB相关疾病的发生机制提供更多的生物学信息。在宁夏某大型养殖场随机选取10头健康待产荷斯坦奶牛,分别于产后0d、7 d、14 d和21 d晨饲前采集瘤胃液。采用16S rRNA高通量测序技术、GC-MS/MS和UPLC-MS/MS代谢组学技术分别检测了奶牛分娩后瘤胃微生物丰度和代谢物含量。试验结果如下:1.瘤胃微生物研究结果表明:奶牛产后7d门水平微生物广古菌门(Euryarchaeota)和绿弯菌门(Chloroflexi)的相对丰度均显著低于产后0d,产后7d属水平微生物甲烷短杆菌(Methanobrevibacter)、克柔丝菌(Flexilinea)和未分类的克里斯滕森菌科(unidentifiedChristensenellaceae)的相对丰度均显著低于产后0d,而未分类的瘤胃菌科(unidentifiedRuminococcaceae)、未分类的普雷沃氏菌科(unidentifiedPrevotellaceae)、Moryella和假丁酸弧菌属(Pseudobutyrivibrio)的相对丰度显著高于产后0 d;产后14 d属水平微生物未分类的瘤胃菌科(unidentifiedRuminococcaceae)、Moryella和未分类的克里斯滕森菌科(unidentifiedChristensenellaceae)显著低于产后7d,欧陆森氏菌(Olsenella)和夏普氏菌属(Sharpea)相对丰度显著高于产后7 d;产后14-21 d没有差异显著的微生物。2.瘤胃短链脂肪酸研究结果表明:奶牛产后7d瘤胃丙酸、丁酸和戊酸的含量显著高于产后0d,而乙酸、异丁酸、异戊酸和己酸的含量无显著变化。产后7-21 d乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸和己酸的含量均无显著变化。微生物与SCFAs相关性分析结果显示,奶牛产后0-7 d广古菌门(Euryarchaeota)与丙酸呈显著性负相关,Chloroflexi与丙酸和戊酸呈显著性负相关,甲烷短杆菌(Methanobrevibacter)与丙酸呈显著负相关,未分类的普雷沃氏菌科(unidentfiedPrevotellaceae)与丙酸、丁酸和戊酸呈显著正相关,假丁酸弧菌属(Pseudobutyrivibrio)与丁酸呈显著性正相关,未分类的瘤胃菌科(unidentifiedRuminococcaceae)与丙酸呈显著性正相关,Moryella与丙酸呈显著性正相关。3.瘤胃代谢物研究结果显示:与产后0d相比,奶牛产后7d有27种代谢物的含量显著升高,35种代谢物显著降低;与产后7 d相比,18种代谢物含量在产后14 d显著升高,4种代谢物显著降低;与产后14 d相比,3种代谢物含量在产后21 d显著升高,8种代谢物显著降低。在这些差异代谢物中,乳糖、D-葡萄糖、酪胺和腺嘌呤含量在奶牛产后0-14 d显著升高,在产后14-21 d显著下降,而吡哆醛含量在产后0-7 d显著下降,7-14 d显著升高,14 d后又逐渐下降到产后7 d的水平。结论:健康奶牛分娩后0-7 d瘤胃微生物发生了显著变化,其代谢物和SCFAs的含量也发生了应答性改变,表明瘤胃微生物区系的改变与NEB密切相关。产后14-21 d瘤胃微生物及其代谢物不再发生显著变化,提示奶牛NEB易发生在产后0-7 d。
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