基于纳米材料为载体的电流型及电位型免疫传感器的研究

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免疫分析方法在抗原-抗体特异性反应的原理上建立起来的分析方法。基于免疫分析法和电化学传感器结合的电化学免疫传感器因其灵敏度高,分析速度快,操作简单,价格低廉及选择性好等优点,在临床诊断、生物分析、环境监测等领域得到了高度重视和广泛应用。电流型和电位型免疫传感器是根据抗原-抗体结合前后的电流、电位的变化来检测生物分子的浓度。传感器的性能主要取决于生物活性物质的固定方法,因此解决把生物活性物质固定在电极上并能保持其生物活性的方法成为当今电化学免疫传感器研究中的重点。纳米材料因其具有良好的吸附能力和生物兼容性等特点已被广泛应用到免疫传感器中作为生物活性物质的载体,且很大程度上提高了传感器的性能。本论文基于此考虑,研究了一系列基于纳米材料为载体的电化学免疫传感器。1.电沉积普鲁士蓝和双层纳米金修饰的免疫传感器的研究用[AuCl4]-和Fe3+/[Fe(CN)6]3-派生物修饰电极表面制备简单且灵敏的电化学免疫传感器。电化学还原[AuCl4]-在玻碳电极(GCE)表面沉积上一层多孔纳米金(NG),然后再电沉积上一层普鲁士蓝(PB),随之电沉积上第二层纳米金以固定癌胚抗体(anti-CEA)制备出一种免疫传感器。双层多孔纳米金颗粒的引入增大了生物分子的固定量,且提高了免疫传感器的灵敏度。PB,一种很好的氧化还原探针,广泛用于电化学分析测定中。在优化的条件下,所制电极的线性范围为3.0~80.0 ng/mL,检测限为0.9 ng/mL(S/N=3)。而且,此免疫电极的选择性、重现性及稳定性都是可以接受的。2.三维立体SiO2@Au和聚硫堇修饰的金电极用于检测CA 15-3的研究基于三维立体SiO2@Au纳米颗粒和聚硫堇(PTH)膜修饰金电极制备新型先进的免疫传感器。并利用交流阻抗测试系统(EIS)和循环伏安法(CV)对免疫传感器的制备、性能及检测癌抗原15-3(CA 15-3)中的相关特性进行了研究。基于三维立体SiO2@Au纳米颗粒的免疫传感器提供了更多的活性位点和更好的吸附特性以固定CA 15-3抗体来选择CA 15-3抗原。在优化的条件下,应用于多个标准样品检测时,修饰好的免疫传感器表现出良好的线性和灵敏度,线性范围为1-8和8-250 U/mL,检测限为0.42 U/mL(S/N=3)。更重要的是,此方法可以延伸至其他抗原或生物分子的检测。3.基于PVC和聚乙烯亚胺复合膜修饰的电位型免疫传感器的研究基于聚四氯乙烯和聚乙烯亚胺复合膜电极吸附纳米金以固定抗体的癌抗原125(CA 125)制备出新型的电位型免疫传感器。所修饰免疫传感器和实验条件利用电位方法来检测。在最优的实验条件下,所制电极关于CA125浓度呈现S形曲线,具有较高的灵敏度,线性范围为0.090到12.612U/mL,检测限为0.028 U/mL,较快的电位响应(小于4 min),且重现性和选择性较好。
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