栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoids Ellis的成熟果实。为临床常用中药，其性味苦，寒，无毒。入心、肝、肺、三焦经。具有泻火除烦，清热利尿，凉血解毒之功效。临床用于热病烦心，黄疸尿赤，血淋涩痛，泻热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡，外治扭挫伤痛。栀子的炮制品从古至今大概有栀子、炒栀子、焦栀子、姜栀子、栀子炭、盐栀子、蜜栀子、酒栀子、童便炒栀子、甘草水炒栀子等等，现今临床应用比较广泛的有栀子、炒栀子、焦栀子和姜栀子。但其炮制的原理至今不明，本论文主要针对临床比较常用的栀子、炒栀子、焦栀子三种饮片从化学成分与药理作用二者之间的关系和内在联系进行炮制原理研究。本论文分三部分。第一部分文献研究系统地查阅了近40年来有关栀子的国内外文献研究资料，对中药栀子的药材来源、化学成分、药材及各种不同炮制品的药理作用及炮制历史沿革、炮制规范、炮制工艺等研究现状进行了综合地、系统的分析和整理，为本课题研究方案的制定和顺利实施提供了有益的借鉴。第二部分实验内容第一章样品的采集及饮片的制备第二章焦栀子化学成分研究通过反复硅胶及ODS柱色谱，从焦栀子中分离得到21种成分。利用化学、光谱(IR，¹H-NMR，¹³C-NMR，¹H-¹H COSY，¹H-¹³C COSY，HMBC，MS)等技术鉴定了其中18个化合物的结构。其中，二萜色素类化合物4个：1．藏红花酸（crocetin），2．藏红花酸糖苷-1（crocin-1），3．藏红花酸糖苷-2（crocin-2）和4．藏红花酸糖苷-3（crocin-3）；环烯醚萜类化合物3个：5．京尼平苷（gcniposidc），6．京尼平-1-β-龙胆双糖苷（genipin-1-β-gentiobioside）和7．6″-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷（6″-O-P-coumaroyl genipingentiobioside）：偶氮类化合物1个：8．苏丹Ⅲ（sudanⅢ），香豆素类化合物2个：9．欧前胡素（imperatorin）和10．异欧前胡素（isoiml^ratorin）：黄酮类化合物2个：11．5-羟基-7，3′，4′，5′-四甲氧基黄酮（5-hydroxy-7，3′，4′，5′-tetramethoxyflavone）和12．5-羟基-6，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮（5-hydroxy-6，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone）；色原酮1个：13．2-甲基-3，5-二羟基色原酮（2-methyl-3，5-dihydroxychromone），葸醌类1个：14．大黄素甲醚（physcion）；五环三萜类化合物1个：15．熊果酸（ursolic acid）；甾醇类化合物1个：16．β-谷甾醇（β-stitosterol）；卟啉环化合物2个：17．叶绿素a和18．叶绿素b（achlomphyll a and b）。化合物8、9、10、11、13、14、17、18等8个化合物为首次从该植物中分离，其中化合物8、11、13、14、17、18等6个化合物为生栀子中没有分到。第三章栀子不同饮片指纹图谱研究采用本文所建立的HPLC指纹图谱分析方法，对栀子不同炮制品的三个乙醇洗脱部位进行分析，能够得到栀子中大部分化学成分的信息，尤其是主要成分的信息能直观的、比较全面地反映中药栀子不同炮制品的内在质量。在所建立的色谱条件下，色谱峰分离比较理想。通过对HPLC指纹图谱进行比较分析后发现，栀子和炒栀子的差异仅仅在色谱峰峰面积的改变，而共有色谱峰的峰数目基本未发生变化，说明栀子和炒栀子相比，其化学成分仅仅在含量上产生一定的变化。而焦栀子与栀子和炒栀子相比色谱图则有明显的差别，主要表现在特征峰的变化，以及某些色谱峰面积的增减，结果表明栀子炒焦后，其化学成分不仅仅是含量发生了变化，还在成分的种类上发生改变，这与含量测定的结果一致，炒焦后栀子主治功效的变化与其物质基础的变化密切相关，即炒焦后化学成分组成和含量的变化导致了焦栀子和栀子的功效有所不同，也为下一步炒制机理的研究找到了切入点。第四章栀子不同饮片主要成分含量研究本部分对栀子中最重要的两类成分：环烯醚萜类和二萜色素类进行了含量测定。初步得出如下规律：炒栀子与栀子相比，色素类成分总量略有下降，但色素类成分的组成没有明显的变化，而环烯醚萜类成分含量增加。两类成分综合作用的结果，炒栀子与栀子相比，只是量上的变化，本质上无明显变化，因此炒栀子炮制后，物质基础的不变决定栀子药性无明显改变，主治功效没有明显的变化。焦栀子与栀子相比，色素类成分总量明显下降，且色素类成分的组成发生了较大的变化，由栀子中以crocin-1和crocin-2为主至焦栀子以crocetin为主，而环烯醚萜类成分与生品含量持平。因此，在炒焦过程中，色素类成分量上和组成上的变化是焦栀子药性和主治功效发生变化的主要原因。据栀子主要成分含量测定结果推断：随着加热程度的加深，其裂解方式有所不同，藏红花酸糖苷-1、藏红花酸糖苷-2和藏红花酸糖苷-3可能随着加热程度的不同失去不同数量的葡萄糖，最终转化为苷元藏红花酸。本试验也验证了在加热过程中色素类成分间的这一转化过程。第五章药理作用和药代动力学研究本部分做了炮制前后变化较大的50％、95％乙醇两个部位及藏红花酸、藏红花酸糖苷-1的药理研究及两成分的药物代谢动力学研究。栀子和焦栀子50％和95％乙醇洗脱部位有明显的抗炎镇痛作用，并且生、焦栀子的95％部位的镇痛作用优于50％部位。栀子抗炎作用强于焦栀子。两种炮制品均无保肝作用，说明栀子的保肝作用的物质基础在30％乙醇洗脱部位。生、焦栀子95％部位能有效抑制正常大鼠血小板聚集，并且焦栀子95％部位有较好的止血作用，能较明显缩短正常大鼠凝血酶原（PT）的时间，而栀子的95％部位没有这种功能。藏红花酸和藏红花糖苷-1具有明显的抗炎作用，藏红花酸糖苷-1镇痛作用较强，两种成分均无保肝作用。两种成分均有较明显的降低高切变率下的全血黏度的作用，从凝血机制全面分析，藏红花酸的凝血作用强于藏红花酸糖苷-1。说明栀子炒焦后凉血止血作用增强与焦栀子中藏红花酸含量明显增加有关，全面分析凝血机制，藏红花酸是焦栀子凉血止血的主要物质基础。藏红花酸和藏红花酸糖苷-1的药代动力学结果表明：即藏红花酸糖苷-1大鼠口服经体内肠道菌群作用后，转化为了3种成分：藏红花酸糖苷-2、藏红花酸糖苷-3和藏红花酸。大鼠直接口服藏红花酸比口服藏红花酸糖苷-1所产生代谢产物血药浓度总和高若干倍，刘同征等研究发现，藏红花酸糖苷-1大鼠口服吸收极差，这可能是导致口服藏红花酸糖苷-1后血药浓度低的直接原因。结果表明，直接口服藏红花酸不但吸收好，而且可以不通过体内菌群的作用直接起效，不受体内菌群作用环境的影响，其作用效果比直接口服藏红花酸糖苷-1强，这也许就是临床上用于凉血止血时直接选用焦栀子的主要原因，也是栀子炒焦后凉血止血作用增强的主要原因。第三部分总结