第一部分5-脂氧合酶抑制剂齐留通抑制二乙基亚硝胺诱导大鼠肝细胞癌形成的实验研究研究背景与目的：原发性肝癌(HCC)是一个世界性的主要健康问题,全球发病率逐年增长；我国是HCC高发的国家。花生四烯酸代谢产物在肿瘤发生、发展及转移中起重要作用。5-脂氧合酶在原发性肝癌中的作用尚不明确。本实验研究5-脂氧合酶在原发性肝癌中的表达,以及5-脂氧合酶抑制剂对肝癌的影响及其机制。方法：Wistar雄性大鼠随机分为3组,正常对照组(n=5)、模型组(n=8)及齐留通组(n=8)。给予大鼠腹腔注射二乙基亚硝胺(DEN)50mg/kg,每周一次,共16周以制作原发性肝癌动物模型。齐留通组大鼠给予5-脂氧合酶抑制剂齐留通50mg/kg灌胃治疗,每天一次。免疫组织化学染色检测肝组织5-脂氧合酶的蛋白表达；逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测肝组织5-脂氧合酶的mRNA表达。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肝癌细胞凋亡。结果：模型组大鼠肝脏可见中、强度5-脂氧合酶的蛋白表达,阳性染色主要位于细胞浆。RT-PCR检测模型组大鼠肝脏5-脂氧合酶mRNA的表达较正常对照组相比明显升高。模型组大鼠肝脏表面结节出现率为8/8(100%),齐留通组结节出现率为5/8(62.5%)。肝脏表面结节计数,模型组大鼠为17.2士3.5,齐留通组大鼠为10.4士3.4,两组相比,有统计学上差异。TUNEL法检测模型组大鼠肝脏仅见少数肝癌细胞阳性表达,而齐留通治疗组大鼠肝脏见大量肝癌细胞阳性表达,前者凋亡指数为0.30土0.09,后者为0.70士0.12,两组相比,有统计学差异。结论：DEN诱发的大鼠原发性肝癌存在5-脂氧合酶表达,5-脂氧合酶抑制剂可防治DEN诱发的大鼠原发性肝癌的形成,其机制与诱导肝癌细胞凋亡相关。第二部分5-脂氧合酶抑制剂齐留通对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响研究背景与目的：5-脂氧合酶是花生四烯酸代谢途径中的一种关键酶。5-脂氧合酶在人类多种癌细胞中存在高表达,如胰腺癌、食管癌、前列腺癌、结肠癌细胞等。在人原发性肝癌细胞中的表达情况未知。本实验研究5-脂氧合酶在人肝癌细胞株HepG2中的表达,以及5-脂氧合酶抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。方法：应用RT-PCR及免疫细胞化学染色检测5-脂氧合酶在人肝癌细胞株HepG2中的表达,采用MTT法及流式细胞术检测5-脂氧合酶抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。结果：5-脂氧合酶蛋白表达于肝癌细胞浆,局灶细胞核膜亦见阳性染色。RT-PCR可检测到肝癌细胞5-脂氧合酶的mRNA的表达。人肝癌细胞株HepG2给予不同浓度的齐留通处理24小时后,细胞存活率呈剂量依赖性下降；流式细胞术检测可见细胞凋亡率呈剂量依赖性升高。结论：人肝癌细胞株HepG2存在5-脂氧合酶的表达,5-脂氧合酶抑制剂可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖,诱导细胞凋亡。第三部分5-脂氧合酶在人肝细胞肝癌中的表达及其临床意义研究背景与目的：5-脂氧合酶在人类多种恶性肿瘤中存在高表达,如胰腺癌、食管癌、前列腺癌、结肠癌等。在结肠癌中,5-脂氧合酶的表达与肿瘤的预后、肿瘤大小、深度和血管侵犯相关。本实验研究5-脂氧合酶在人原发性肝癌中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法：应用免疫组化检测5-脂氧合酶在人原发性肝癌及癌旁正常肝组织石蜡标本中的表达。采用Fisher’s精确概率或x2检验分析5-脂氧合酶蛋白表达与原发性肝癌临床病理特征的相关性。结果：在人癌旁正常肝组织中,几乎无5-脂氧合酶的表达或弱表达。在人肝癌标本中,20例中有16例(80%)有中等强度的5-脂氧合酶表达,局部癌细胞表达较强,主要为胞浆表达。5-脂氧合酶蛋白在肝癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、AJCC分期和血清AFP水平间均没有明显相关性。结论：人原发性肝癌组织存在5-脂氧合酶的表达。5-脂氧合酶的蛋白表达与原发性肝癌的临床病理特征没有明显的相关性。