黄鲫蛋白抗菌肽的消化性及富集研究

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本论文以海产黄鲫鱼为原始材料,采用胃蛋白酶水解法制备出具有抑菌活性的黄鲫蛋白抗菌肽作为实验样品,主要进行以下三方面研究:(1)体外模拟胃液下黄鲫蛋白抗菌肽的消化特性;(2)体外模拟肠液下黄鲫蛋白抗菌肽的消化特性;(3)Fe3O4@SiO2纳米粒子富集黄鲫蛋白抗菌肽。通过体外模拟胃液消化模型研究黄鲫蛋白抗菌肽的消化特性,测定消化时间0120 min下黄鲫蛋白抗菌肽的蛋白浓度、肽浓度、总氨基酸含量、糖化血清含量、葡萄糖含量和总抗氧化能力。结果表明,添加葡萄糖和果糖的黄鲫蛋白抗菌肽在胃液消化过程中:肽浓度和总氨基酸含量增加;蛋白浓度、糖化血清蛋白(GSP)含量和总抗氧化能力降低。在消化结束后(消化至120 min时),添加果糖的黄鲫蛋白抗菌肽的肽浓度、蛋白浓度、总氨基酸含量、总抗氧化能力高于添加葡萄糖的黄鲫蛋白抗菌肽的肽浓度、蛋白浓度、总氨基酸含量、总抗氧化能力。通过体外模拟肠液消化模型研究黄鲫蛋白抗菌肽的消化特性,测定消化时间05h下黄鲫蛋白抗菌肽的蛋白浓度、肽浓度、总氨基酸含量、糖化血清含量、葡萄糖含量和总抗氧化能力。结果表明,黄鲫蛋白抗菌肽在肠液消化过程中:蛋白浓度、GSP含量降低,总氨基酸含量和总抗氧化能力增加。在消化结束后(消化至5h时),添加果糖的黄鲫蛋白抗菌肽的总氨基酸含量、GSP含量、总抗氧化能力均明显高于添加葡萄糖的黄鲫蛋白抗菌肽的总氨基酸含量、GSP含量、总抗氧化能力。以磁性Fe3O4粒子为基粒,采用溶胶-凝胶法键合二氧化硅改性磁性纳米Fe3O4用于黄鲫蛋白抗菌肽的富集。透射电镜分析结果显示改性磁性纳米Fe3O4吸附黄鲫蛋白抗菌肽,可在磁性纳米Fe3O4粒子表面形成“冕层”。经改性Fe3O4吸附后,黄鲫蛋白抗菌肽液对大肠杆菌的抑菌作用显著降低,其中黄鲫蛋白抗菌肽中的肽含量、蛋白质含量分别由吸附前的7.249 mg和416.221μg降低到6.297 mg和346.183μg,而吸附后肽液中氨基酸含量则略有提高。高效液相分析结果表明黄鲫蛋白抗菌肽经改性磁性Fe3O4吸附后主要分离峰的保留时间和峰面积均发生改变,说明改性磁性Fe3O4能有效吸附黄鲫蛋白肽中的抗菌肽,实现富集抗菌组分作用。
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