目的:通过材料表面化学-维生素D₃联合刺激成骨细胞,观察细胞早期粘附、增殖、分化、铺展、形态等早期生物学行为的改变,探讨联合刺激对成骨细胞生物学行为影响的可能机制。方法:以空白组织培养载玻片为对照,通过硅-烷基自组装技术在组织培养载玻片表面构建羟基、氨基、甲基三种材料表面。采用水接触角和X射线光电子能谱（XPS）对得到的材料表面进行表征。复苏MC3T3-E1成骨细胞株,观察单纯化学刺激对成骨细胞早期粘附、增殖、分化及细胞形态的影响,作为对照组。利用无水乙醇溶解维生素D₃来配制浓度分别为10^-7mol/L、10^-8mol/L、10^-9mol/L维生素D₃的培养液,考察不同浓度维生素D₃与材料表面化学联合刺激条件下成骨细胞早期应答行为的差异,在维生素D₃加入后的不同时间点,分别用血球计数板、CCK-8、ALP、BCA检测试剂盒、茜素红染料及免疫荧光染色技术等分别检测各组成骨细胞在不同浓度维生素D₃和材料表面化学联合刺激条件下细胞早期粘附、增殖及分化、细胞黏着斑和细胞骨架结构。结果:水接触角结果显示各组材料表面的亲疏水性发生了明显的改变。羟基表面的亲水性增强,而甲基表面则为高度疏水,氨基表面具有适宜的亲疏水度。四种材料通过XPS的Si谱及C谱检测出各个元素在材料表面的存在方式,两者的测试结果证明了本研究成功制备出具有不同化学基团的组织培养载玻片表面（-OH、-NH₂、-CH₃）。在单纯化学刺激组中发现发现化学基团的材料表面能够影响成骨细胞生物学行为,NH₂表面促进细胞粘附、增殖与分化,增加细胞活性;OH和CH₃表面表现为抑制作用,其规律为NH₂>Glass>OH≈CH₃。造成该结果的主要原因是各组材料表面亲疏水性及表面所带电荷的不同。在材料表面化学-维生素D₃联合刺激组与对照组对比中发现中、高浓度维生素D₃(10^-8mol/L、10^-7mol/L)能够促进各组材料表面成骨细胞的早期分化及黏着斑和细胞骨架肌动蛋白丝（F-actin）结构的形成,抑制成骨细胞的早期增殖及粘附;低浓度的维生素D₃(10^-9mol/L)能促进各组材料表面成骨细胞的早期增殖,抑制成骨细胞的早期分化及黏着斑和细胞骨架肌动蛋白丝（F-actin）结构的形成。结论:维生素D₃和材料表面化学联合刺激能够引起各个材料表面的成骨细胞的早期应答,但应答程度有所不同。其机制可能是由于材料表面化学-维生素D₃联合刺激对细胞的黏着斑和细胞骨架造成的差异,进而引起后续一系列细胞早期行为的差异,因此研究成骨细胞早期行为与维生素D₃和材料表面化学联合刺激之间的关系是十分有必要的,它可以为治疗骨质疏松症以及体外构建组织工程骨模型提供有力的理论依据。