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研究手性金属配合物与核酸的分子识别对于发展以核酸为靶点的手性药物具有重要意义。G-四链DNA已经成为特异性抗肿瘤药物的一个潜在靶点。最近发现一些金属配合物能够稳定G-四链DNA,关于这方面的研究在国际上已备受关注。
本文通过圆二色光谱、紫外可见吸收光谱、荧光光谱、红外傅立叶变换表面等离子共振,停流动力学实验、电泳、酶切等手段研究了手性化合物与双链DNA、G-四链DNA之间的手性识别。另外,基于G-四链结构,我们发展了一种简便的DNA检测体系,主要结果如下:
1、手性金属超分子化合物可以在无盐的条件下诱导单链的人类端粒DNA向G-四链转化,并且显示出手性选择性。P-对映体能够在无盐条件下区分出不同的G-四链序列,可以特异性的识别人类端粒DNA序列,并且这种识别具有Loop区序列依赖性。
2.在Na-条件下,M-对映体不与短端粒单倍体四链特异作用,却与长端粒二倍体四链特异作用。M-对映体结合在二倍体四链的linker区,并且使之结构变得紧凑。在K+条件下,手性超分子化合物与长端粒DNA的作用依然存在手性选择性。
3.一对手性螺旋大环镧系离子(Ⅲ)配合物对不同序列的双链DNA的热稳定性存在手性选择性。P-对映体可以稳定GC-DNA和AT-DNA。而M-对映体稳定AT-DNA,却去稳定GC-DNA。P-对映体对GC序列优先结合,M-对映体则对AT序列优先结合。另外,这一对对映体均与DNA的小沟结合。
4.基于靶向DNA与双链探针作用后所释放的G-四链结构与NMM小分子的特异作用,我们所设计了一种简便的、免荧光标记的、外切酶Ⅲ辅助放大信号的DNA检测方法,并实现了对目标DNA高灵敏度、高选择性的检测。