顺-3-己烯醇诱导茶树对茶尺蠖抗性的分子机制

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在漫长的协同进化中,植物进化出了包括诱导抗性在内的一系列对抗植食性昆虫的手段。植物的抗虫相关基因的表达和防御物质的合成会被一些物质激活,进入“priming”的抗虫预启动状态。绿叶挥发物(green leaf volatiles,GLVs)在诱导抗虫反应的priming状态中起着重要作用,它可以上调或者加速植物对于植食性害虫取食的响应。但是目前关于priming诱导物质如何精准的调控后续反应知之甚少。茶树(Camellia sinensis)是原产于中国的重要经济作物,拥有令人瞩目的营养价值和经济价值。但是,茶树经常因茶尺蠖(Ectropis obliqua Prout)的取食危害减产甚至绝产。顺-3-己烯醇((Z)-3-hexenol,z3HOL)作为GLVs的重要组成物质,可以诱导茶树进入预启动状态以对抗茶尺蠖的取食危害,但是其诱导的机理尚不清晰。在本研究中,我们利用z3HOL喷施龙井43号茶树幼苗并取其幼嫩叶片饲喂茶尺蠖幼虫,对不同处理下茶尺蠖幼虫的生长发育状况进行测定;对茶尺蠖幼虫取食的经和未经z3HOL处理的茶树叶片进行了转录组测序,并对数据进行分析挖掘;对转录组数据显示的差异性比表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行了基于实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)的表达水平验证,主要研究结果如下:(1)连续饲喂经z3HOL处理过的茶树嫩叶,会明显降低2龄和3龄的茶尺蠖幼虫体重量会下降25%30%,但是对4龄幼虫无明显影响;实验组2龄和3龄幼虫幼虫死亡率会上升0.43倍和0.3倍,但是对4龄幼虫无明显影响;实验组幼虫发育历期显著延长。(2)对转录组测序结果进行分析,共有318条基因出现了差异性表达。其中,有58条基因与茶树的抗性相关,包括:6条控制茉莉酸和乙烯合成的关键酶基因、26条信号转导相关基因、12条转录因子相关基因、14条直接或间接抗性相关基因。(3)选择20条差异性表达基因进行qRT-PCR验证,这20条DEGs包括14条信号转导相关基因和6条诱导抗性相关基因。所选基因在茶尺蠖幼虫取食后表达水平均发生上调;有18条基因在z3HOL和茶尺蠖取食的双重处理下表达水平显著高于茶尺蠖幼虫单一处理;有18条基因在JA和机械损伤的不同处理下表达水平上调;有5条信号转导基因在ACC的处理下差异性表达。我们研究结果表明,经z3HOL诱导处于预启动状态的茶树受到茶尺蠖幼虫取食后,茶树会通过位于细胞膜表面的蛋白激酶RLKs和Ca2+信号物质快速感受到这些危害刺激。这些信号途径会在短时间内激活MAPK级联反应和WRKY转录因子。这些被激活的处于上游的MPKs和WRKYs又接着上调防御相关信号物质合成的基因,进而增加植物体内JA、ET等防御类物质的含量,并以此来实现对于植食性昆虫危害的直接或间接防御。同时,JA含量水平的增加又会激活早期信号传导基因的表达如RLKs和Ca2+,因此,可以作为抗性循环中放大信号的物质,并进一步提升植物的防御能力。
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