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目的:由于社会经济的原因越来越多的妇女推迟生育孩子的年龄,妇女开始做母亲的年龄不断增大。但是随之而来,妇女乳腺癌的发病率也迅速上升。乳腺癌被认为是多种病原学共同作用的结果,其中公认的一项危险因素是生育。许多流行病学研究证实,未经产妇女同经产妇女相比,乳腺癌发病率明显增高,然而,迄今没有充足的实验数据说明上述结果的正确性。本文通过动物实验研究生育及生育早晚对二甲基苯蒽(DMBA)诱导的SD大鼠乳腺癌发生、发展的影响,探讨生育对乳腺癌发生、发展的相关性,对更新乳腺癌防治观念,降低乳腺癌的发病率起到一定的指导作用。方法:1.本试验分别选取8周龄的健康雌性SD处鼠80只,36周龄的健康雌性SD处鼠40只,12周龄的健康雄性SD大鼠10只,共计130只。将所用120只SD雌鼠随机分为试验组和对照组:①8周龄处鼠组20只(早生育对照组);②8周龄处鼠DMBA组20只(早生育试验组)③36周龄处鼠组20只(晚生育对照组);④36周龄处鼠DMBA组20只(晚生育试验组)⑤8周龄处鼠组20只(未生育对照组);⑥8周龄处鼠DMBA组20只(未生育试验组)。2.所有大鼠在适应饲养一周后开始实验。将8周龄40只和36周龄40只SD雌性处鼠均与雄鼠交配,生育一周后(未给幼仔哺乳),将其中的早生育试验组20只和晚生育试验组20只连同未生育试验组20只处鼠分别按体重分两次给予10mg/100gDMBA灌胃(两次给药间隔2周)。生育对照组和未生育对照组给予正常饮食喂养,不给予任何干预措施。3.试验组DMBA给药时间分别达到24周后连同相应对照组全部处死并解剖,进行肉眼观察,取乳腺及肿瘤组织石蜡包埋,每个蜡块切片进行常规的H-E染色和AgNOR经典染色法进行大鼠乳腺上皮细胞的核仁组成区嗜银染色计数,用免疫组化二步法检测C-erbB-2、PCNA、Ki-67、MCM2在大鼠乳腺上皮细胞中的表达。4.所有计数结果用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果:1.发病率:至24周试验结束时,共有32只大鼠发病。未生育DMBA组存活20只,有19只发病,发病率为95.0%;早生育DMBA组存活18只,有3只发病,发病率为16.7%;晚生育DMBA组存活17只,有10只发病,发病率为58.8%。对照组均无发病。经过统计学Fisher确切概率法处理,未生育DMBA组和早生育DMBA组之间、未生育DMBA组和晚生育DMBA组之间、早生育DMBA组和晚生育DMBA组之间的发病率均具有统计学上的差异(分别为p=9.59×10-7、p=0.014、p=0.015)。2.潜伏期:以第一次给予二甲基苯蒽至触诊大鼠发现肿瘤计算潜伏期。至24周试验结束时未生育DMBA组(10.25±0.83)周、早生育DMBA组(17.25±3.20)周;晚生育DMBA组(14.50±0.96)周。经过统计学秩和检验处理,未生育DMBA组和早生育DMBA组之间、未生育DMBA组和晚生育DMBA组之间、早生育DMBA组和晚生育DMBA组之间的发病率均具有统计学上的差异(分别为p=0.001、p=1.90×10-6、p=0.014)。3.肿瘤直径:所有发病大鼠的肿瘤直径以肿瘤的长径计数。未生育DMBA组为(2.86±0.54)厘米,早生育DMBA组肿瘤直径为(2.65±1.67)厘米;晚生育DMBA组(2.41±0.50)厘米。经过统计学秩和检验处理,三组之间的肿瘤大小无统计学差异(p=1.00、p=0.54、p=0.81)。4.AgNOR计数:未生育DMBA组为7.52±1.24;早生育DMBA组为:3.52±3.00;晚生育DMBA组为:4.76±1.20。经过统计学秩和检验处理,未生育DMBA组和早生育DMBA组之间、未生育DMBA组与晚生育DMBA组之间比较具有统计学差异(P=0.009,P=0.008)。早生育DMBA组和晚生育DMBA组之间比较无统计学差异(P=0.287)。5.C-erbB-2蛋白表达:统计学处理时将“-”和“+”归为一组(阴性表达),“++”和“+++”归为一组计算(阳性表达)。未生育DMBA组阴性表达:4,阳性表达:16;早生育DMBA组阴性表达:15,阳性表达:3;晚生育DMBA组阴性表达:12,阳性表达:5。用Fisher确切概率法统计:未生育DMBA组和早生育DMBA组之间、未生育DMBA组与晚生育DMBA组之间比较具有统计学差异(p=0.00023,p=0.003)。早生育DMBA组和晚生育DMBA组之间比较无统计学差异(p=0.443)。6.PCNA的表达:统计学处理时将“-”和“+”归为一组(阴性表达),“++”和“+++”归为一组计算(阳性表达)。未生育DMBA组阴性表达:6,阳性表达:14;早生育DMBA组阴性表达:15,阳性表达:3;晚生育DMBA组阴性表达:13,阳性表达:4。用Fisher确切概率统计:未生育DMBA组和早生育DMBA组之间、未生育DMBA组与晚生育DMBA组之间比较具有统计学差异(p=0.001,p=0.008)。早生育DMBA组和晚生育DMBA组之间比较无统计学差异(p=0.691)。7.Ki-67的表达:统计学处理时将“-”和“+”归为一组,“++”和“+++”归为一组计算。未生育DMBA组阴性表达:3,阳性表达:17;早生育DMBA组阴性表达:15,阳性表达:3;晚生育DMBA组阴性表达:11,阳性表达:6。用Fisher确切概率统计:未生育DMBA组和早生育DMBA组之间、未生育DMBA组与晚生育DMBA组之间比较具有统计学差异(p=5.1×10-5,p=0.003)。早生育DMBA组和晚生育DMBA组之间比较无统计学差异(p=0.264)。8.MCM2的表达:统计学处理时将“-”和“+”归为一组,“++”和“+++”归为一组计算。未生育DMBA组阴性表达:4,阳性表达:16;早生育DMBA组阴性表达:15,阳性表达:3;晚生育DMBA组阴性表达:11,阳性表达:6.用Fisher确切概率统计:未生育DMBA组和早生育DMBA组之间、未生育DMBA组与晚生育DMBA组之间比较具有统计学差异(p=0.00023,p=0.008)。早生育DMBA组和晚生育DMBA组之间比较无统计学差异(p=0.264)。结论:1.给予SD大鼠单次剂量10mg/100g DMBA两次灌胃,可以成功制作大鼠乳腺癌的动物模型,以模拟人体乳腺肿瘤的发生、发展过程,进行有关乳腺癌发生机理的研究和各种干预试验。2.生育可以降低DMBA诱导的SD大鼠乳腺组织的致癌作用。3.未生育SD大鼠对DMBA的敏感性强于生育SD大鼠,致癌率高于生育SD大鼠。4.晚生育SD大鼠对DMBA的敏感性强于早生育SD大鼠,致癌率高于早生育SD大鼠。5.生育可以降低DMBA诱导的SD大鼠乳腺癌组织中AgNOR、C-erbB-2、PCNA、Ki-67、MCM2的表达,预示着有较好的预后。