雌激素延缓椎间盘退变机制分析及脊柱侧弯分型与影像学研究

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第二章(第一节)雌激素是否通过促进自噬途径减缓去卵巢大鼠椎间盘退变?目的:本研究将对雌激素是否通过调控椎间盘组织的自噬水平来减缓椎间盘退变。方法:选取60只3月龄雌性SD大鼠,随机分为:假手术组(sham组)、对照组(OVX组)、雌激素组(OVX+E组)和自噬抑制组(OVX+E+3-MA组),每组15只,除A组大鼠行假手术外,B、C、D组均行卵巢切除术。对分组后的大鼠注射不同药物。A、B组皮下注射橄榄油,C、D组皮下注射17β-雌二醇;A、B、C组腹腔注射生理盐水,D组腹腔注射3-MA。每周注射5次,连续注射16周。大鼠麻醉后,行脊柱CT扫描。处死大鼠,手术获取L1/2、L2/3、L3/4椎间盘髓核组织,运用Western Blot检测椎间盘退变相关蛋白与自噬相关蛋白;取L5/6椎间盘髓核组织置于电镜固定液中,行投射电镜扫描观测髓核细胞内自噬小体。保留L4、L5椎体及L4/5椎间盘,脱钙后行石蜡包埋,切片后行免疫组化,检测退变相关蛋白与自噬相关蛋白。结果:四组大鼠的脊柱CT扫描未见椎间隙高度、椎体高度、终板完整度等存在差异。Western Blot结果显示,OVX组椎间盘髓核细胞的Col2α表达量较Sham组减少,OVX+E组的Col2α表达量高于OVX组,OVX+E+3-MA组的Col2α表达量少于Sham组与OVX+E组。OVX组的Beclin-1表达量少于Sham组,OVX+E组的Beclin-1表达量高于OVX组,OVX+E+3-MA组的表达量小于Sham组与OVX+E组。H.E.染色结果显示,Sham组椎间盘髓核细胞较多,OVX组髓核细胞数量较Sham组减少,OVX+E组髓核细胞数量多于OVX组,OVX+E+3-MA组髓核细胞数量少于Sham组与OVX组。Sham组Col1α表达量较低,OVX组Col1α表达量较Sham组有所升高,OVX+E组表达量低于OVX组,OVX+E+3-MA组Col1α表达量高于Sham组与OVX+E组。Sham组的Beclin-1与LC3表达量均高于OVX组,OVX+E组的表达量高于OVX组,OVX+E+3-MA组的Beclin-1与LC3表达低于Sham组与OVX+E组。扫描电镜结果显示,Sham组与OVX+E组的自噬小体较多,而OVX组与OVX+E+3-MA组的自噬小体较少。结论:大鼠在卵巢切除后,椎间盘髓核细胞数量减少,Col1α表达量增加,Col2α表达量减少,表示大鼠椎间盘发生了退变,而补充雌激素可以改善椎间盘的退变情况。卵巢切除大鼠的椎间盘髓核细胞Beclin-1与LC3表达量减少,自噬小体减少,而补充雌激素后Beclin-1与LC3和自噬小体再次增多,表明雌激素可以促进大鼠椎间盘髓核细胞自噬。在卵巢切除大鼠补充刺激素又注射自噬抑制剂后,椎间盘退变再次加重,说明在大鼠中,雌激素可以通过促进自噬来减缓椎间盘的退变。第三章(第一节)骨盆参数能否预测Lenke 1型AIS患者理想的术后胸椎后凸角?目的:本研究的目的是在正常青少年中构建由TK(thoracic kyphosis)和骨盆参数构成的公式,并在 Lenke 1 型 AIS(adolescent idiopathic scoliosis)患者中,预测理想的术前和术后胸椎后凸。方法:共有60名健康青少年被用来验证提出的公式是否正确。当实际TK与公式计算出的理论TK相差小于10°,则认为该公式适用于被试者群体。若已提出的公式不适用,则利用多元回归,在这些健康青少年中建立新的预测公式。新的预测公式将在40名Lenke 1型AIS患者中验证。结果:在60名健康青少年中,仅有26名(43.33%)符合调整后的公式:TK=2×(LL-10)-PI。配对t检验显示,理论TK(theoretical TK,tTK)与实际TK显著不同(41.23±18.29°vs.24.80±8.75°,P<0.001)。多元线性回归分析表明,TK与LL(lumbar lordosis)、SS(sacral slope)和年龄呈正相关(R2=0.331):TK=-0.785×LL-0.843×SS+0.858×年龄+3.754。Lenke 1型AIS患者术前、术后和末次随访时分别有 27 人(67.50%)、32 人(80.00%)、35 人(87.50%)符合本公式。结论:本研究结果表明,成人矢状面序列的预测公式并不适用于青少年。本研究基于健康的青少年人群,建立了一个预测理想TK的新公式。在Lenke 1型AIS患者中,有85%的患者的术后TK符合上述预测公式。表明在制定手术策略时,我们提出的新公式可以为理想TK的重建提供一定的参考价值。第三章(第二节)在SRS-Schwab分型矢状面修正参数不同的成人脊柱畸形患者中:病因学是否会影响患者的HRQoL?目的:本研究的目的是明确在SRS-Schwab分型矢状面修正参数不同的成人脊柱畸形(adult spinal deformity,ASD)患者中,病因学是否会影响患者的健康相关生活质量(health related quality of life,HRQoL)。方法:共79例ASD患者根据病因分为2组:特发性脊柱侧弯组(女性18名,男性11名,平均年龄33.7岁)和退变性脊柱侧弯组(女性29名,男性21名,平均年龄62.1岁)。HRQoL评分包括SRS-22、SF-36和ODI等生活质量评分。为了排除年龄对HRQoL的干扰,ODI评分根据一般人群各个年龄段ODI的平均值进行了调整。运用方差分析(ANOVA)分析SRS-Schwab分型中三种矢状面修正参数不同分级在各组患者中HRQoL的差异性。运用t检验分析在相同SRS-Schwab矢状面修正参数的两组患者之间HRQoL的差异。结果:与退变性脊柱侧弯(de novo scoliosis,DS)组相比,特发性脊柱侧弯组(idiopathic scoliosis,IS)组的 SF-36(59.9 vs.41.6,p<0.01)和 ODI 评分(20.67 vs.40.5,p<0.01)更好。根据不同年龄段一般人群矫正后的ODI显示DS组病人的生活质量更差(8.8 vs.18.0,p=0.03)。IS组患者的SF-36在PI-LL修正参数不同分级(0,+,++)中存在显著差异(62.31 vs.73.96 vs.24.04,p=0.03),而在DS组中没有见到这种差异。IS组患者的HRQoL评分通常高于SRS-Schwab分型矢状面修正参数相同的DS患者。矫正后的ODI在0级PI-LL和0级SVA的IS患者中都较DS患者更好,且在0级PT的IS患者中显著好于DS患者。DS患者的SF-36评分在3种矢状面修正参数相同时均差于IS组患者。结论:在使用SRS-Schwab分型是,不应忽视病因学的影响。IS患者的HRQoL好于具有相同SRS-Schwab分型矢状面修正参数的DS患者。所以在制定手术策略时应该考虑病因学的影响。第三章(第三节)支具治疗是否会改善AIS患者的胸廓不对称?目的:本研究的目的在于确定支具治疗后,AIS(adolescent idiopathic scoliosis)患者的胸廓和乳房不对称是否会得到改善。方法:分别对20名有支具治疗史和20名无支具治疗史的Lenke 1型AIS患者进了回顾性分析。两组的Cobb角和顶椎位置是一对一匹配的。在患者大体照片上测量5个形态学参数,并在术前CT上测量11个影像学参数。RAml角以及凸凹侧参数的差值用以描述胸廓和乳房不对称的程度。结果:支具治疗组和非支具治疗组的平均年龄没有显著差异(15.3岁vs.16.1岁,P=0.169),两组的主弯Cobb角和顶椎匹配良好(P=1.000,P=0.178)。支具治疗组的凸凹侧胸骨切迹-乳头距离(sternal notch-nipple length,SNL)的差值明显小于非支具治疗组(-2.5±8.7mm vs.-12±9.1mm,P=0.001)。其它形态学参数与影像学参数未见明显差异。结论:结果表明支具治疗不会加重AIS患者胸廓和乳房的不对称,并且对乳房的不对称甚至有一定的改善作用。
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