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背景与目的:脑缺血损伤后细胞凋亡受许多基因调控。在调节细胞凋亡的三种途径中，线粒体和死亡受体途径已受到广泛关注，而内质网途径研究相对少见，且多集中在体外细胞研究方面。脑缺血再灌注后存在钙稳态失衡和过氧化损伤，由此可引起内质网应激反应，导致蛋白质翻译水平下降和诱发细胞凋亡。在内质网应激(ERS)反应中，PERK介导的UPR信号通路颇为重要，因为该基因的活化而引起的eIF2 α磷酸化可直接诱发蛋白质合成抑制，并可诱导ATF4、CHOP与GADD34等UPR靶基因在缺血后表达。体外研究揭示PERK通路活化所致的蛋白质合成抑制在短时间内与细胞的自我保护、促进细胞存活有关，长时间的蛋白质合成抑制则可通过一些致凋亡基因如CHOP、caspase-12的表达诱导细胞凋亡。目前在脑缺血模型中有关PERK介导的UPR信号通路的研究极为少见，且所用模型不一，尚缺乏在大鼠短暂性MCAO模型中对PERK、ATF4、CHOP、GADD34等基因表达动态变化的系统研究。
本研究第一部分通过检测局灶性脑缺血后PERK、ATF4、CHOP和GADD34等UPR基因在大鼠脑内的表达变化，以探讨它们在脑缺血损伤中的作用及其与细胞凋亡的关系，从而为完善脑缺血后细胞凋亡的分子调控机制提供实验基础；第二部分则应用自由基清除剂依达拉奉对大鼠短暂性MCAO模型进行干预，研究依达拉奉对ERS后PERK通路相关基因表达的影响，结合细胞凋亡检测及脑梗死体积测定，以期阐明依达拉奉新的神经保护机制，从而为临床治疗脑缺血提供理论基础和新的治疗思路。
方法:
实验第一部分将10-12周龄健康雄性SD大鼠156只随机分为正常组(n=12)、假手术组(n=72)和脑缺血模型组(n=72)；
实验第二部分使用健康雄性SD大鼠144只，脑缺血模型制作成功后随机分为对照组(n=72)和依达拉奉干预组(n=72)。均采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型，缺血2小时后恢复再灌注，Longa’s的5级标准评分法评价神经功能缺损。再灌注后1h、3h、6h、12h、24h及72h处死动物。HE染色和Nissl染色观察病理学变化，TTC染色测定脑梗死体积，免疫组织化学及RT-PCR法分别检测缺血侧顶叶大脑皮层p-PERK、ATF4、CHOP、GADD34等蛋白和mRNA表达变化；末端标记法原位检测神经细胞凋亡。
结论:
1．脑缺血再灌注诱发了内质网应激，启动了PERK介导的UPR信号通路。
2．大鼠脑缺血再灌注后，CHOP mRNA在12小时内表达增加，蛋白水平在24小时内表达增加，其动态变化与细胞凋亡的变化相平行，可能在神经细胞凋亡中发挥作用。
3．依达拉奉可以改善脑缺血再灌注后大鼠神经功能缺损并减少梗死体积。
4．依达拉奉通过下调大鼠脑缺血再灌注后PERK、ATF4、CHOP、GADD34的表达抑制内质网应激反应及随后的凋亡信号通路，从而减少神经细胞凋亡，减轻脑缺血再灌注损伤。