论文部分内容阅读
胸腺五肽(Thymopentin, TP-5),是由胸腺生成素49个氨基酸中第32-36位的五肽片段(Arg-Lys-Asp-Val-Tyr)构成的多肽小分子类药物,是胸腺生成素的活性部位。胸腺五肽具有与母肽相同的生物功能和药效,临床上主要用于治疗恶性肿瘤、慢性肝炎、自身免疫功能紊乱性疾病等。胸腺五肽注射进入人体后很快被体内的氨肽酶和蛋白酶水解,在血浆中的半衰期仅为30s,每日肌肉注射1-2支,因需频繁注射,给患者身体、心理和经济都带来很大的负担。微乳(Microemulsions)又称为纳米乳,是由水相、油相、表面活性剂和助表面活性剂按适当比例自发形成的一种透明或半透明的、低黏度、各向同性且热力学稳定的溶液体系。微乳作为一种新的药物载体,可以保持蛋白质、多肽类药物的稳定性,使药物吸收迅速、完全、从而达到增强疗效,降低毒副作用,提高其生物利用度的作用。本文拟以油包水型微乳作为药物载体,胸腺五肽作为模型药物,系统研究空白微乳及胸腺五肽微乳(Thymopentin microemulsions)的处方筛选、鉴别、稳定性考察；建立胸腺五肽微乳的含量测定方法。本研究为胸腺五肽非注射给药提供了剂型方面的研究。采用km值滴定法,搅拌制备胸腺五肽微乳,滴定至微浑浊,绘制三元相图,以微乳的区域面积和最大载水量作为微乳处方筛选的指标,通过单因素试验,筛选出用于不同剂型的胸腺五肽微乳包括胸腺五肽微乳1(大豆磷脂,含醇)和胸腺五肽微乳2(Span80-Tween80,不含醇),通过离心法、染料法、稀释法、电导率法进行微乳的鉴别,考察微乳耐酸碱、离子强度、耐温的稳定性；通过马尔文Zeta sizer测定微乳的粒径及其分布,折光率仪测定微乳的折光率,旋转黏度计测定微乳的黏度,考察空白微乳及胸腺五肽微乳的理化性质；蛋白类药物前处理的方法主要有：萃取法、酸解法、表面活性剂破乳法等,本文通过对液氮冷冻法、酸解法、饱和氯化钠破乳法、流动相破乳法、甲醇稀释法、TritonX-100破乳法进行比较,HPLC法测定胸腺五肽微乳的含量,并建立整体的胸腺五肽反相微乳含量测定的方法学。为将胸腺五肽微乳直肠给药,本研究制备水溶性基质的中空栓剂：通过基质的复配,考察中空栓剂的外观性状及硬度,最终选取稳定性好的中空栓剂处方,进行质量评价。通过胸腺五肽微乳的处方筛选,可得最佳制备处方分别为：①IPM:大豆磷脂+无水乙醇：水=4：5：1。②IPM:Span80-Tween80:水=4.6：4.5：0.9：通过鉴别均为油包水型微乳,经测定得胸腺五肽微乳1(TP5-ME1)的粒径为14.6nm,多分散系数为0.851,胸腺五肽微乳2(TP5-ME2)的粒径为12.8nm,多分散系数1.000；采用正交实验优化后,确定TP5-ME1最佳破乳工艺为：10%的Triton X-100溶液破乳后,超声时间5min,离心5000xg,5min; TP5-ME2采用酸解法破乳；HPLC法测定主药的含量,TP5-ME1和TP5-ME2的平均含量分别为(94.8±2.9)%、(97.3±0.4)%；中空栓剂基质最佳处方为PEG1500:S40=7:3+1%的甘油,重量差异为(1.1810±0.0088)g。实验研究可得：本实验最佳处方制得的胸腺五肽微乳(TP5-ME)稳定性好,粒径适中,建立的含量测定的方法简便、准确、专属性强,可用于胸腺五肽微乳的质量控制；中空栓剂外观细腻均匀无裂纹,硬度适中。