弓形虫感染对小鼠脑等组织器官的影响及其临床检测

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弓形虫病是由真球虫目,肉孢子虫科,弓形虫属的刚地弓形虫引起的一种世界分布的人畜共患原虫病。该病原最早于1908年由法国学者Nicolle和Manceaux在北非突尼斯刚地梳趾鼠的肝脏和脾脏单核细胞内发现的。弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种世界性分布的寄生在多种温血动物和人的多种有核细胞内的专性细胞内寄生性原虫。可感染包括人在内的140多种动物。随着经济的发展,人类感染弓形虫的机会随之增大,弓形虫病现已成为一种重要的人畜共患病该虫呈世界性分布,广泛存在于多种哺乳动物,人群抗体阳性率为25%~50%.弓形虫无论通过什么途径侵入人体,虫体均经局部淋巴结或直接进入血液循环,形成虫血症,然后再散播到全身其他组织和器官。本实验通过弓形虫感染7周龄雄性成年Balb/c小鼠,建立了弓形虫感染小鼠的模型,观察弓形虫感染后,机体各组织器官的病理变化,以及在弓形虫感染时,脑中小胶质细胞的变化。实验将45只7周龄雄性成年Balb/c小鼠分成感染组和对照组,感染组30只,对照组15只,通过用弓形虫PLK株,以104/只腹腔感染,感染组和对照组分别给予相同的饲养条件,每日观察小鼠的生长状态,分别在7,14,21天各取感染组和对照组小鼠若干剖检,取其心,肝,脾,肺,肾,脑,胸腺,肠系膜淋巴结,十二指肠,空肠,回肠等组织。制作常规的石蜡切片,通过对各组织器官的切片的H.E染色,观察弓形虫感染后,机体各组织器官的病理变化,并选取不同日龄小鼠的大脑,通过免疫组化的方法观察弓形虫感染过程中,小胶质细胞的病理学变化,从而阐明在弓形虫感染后,脑中小胶质细胞的功能机制。并采用免疫组化的方法对来源于黑龙江不同地区不同猪场中425头猪进行检测,并对黑龙江地区感染弓形虫情况进行评估。实验表明:小鼠经过弓形虫感染后,在7,14,21天有部分小鼠表现出颤抖,精神不振,被毛逆立等症状,甚至死亡。在7,14,21天,分别取感染组和对照组小鼠若干,剖检可见感染7天的感染组小鼠,肝、脾肿大,腹腔积液,而感染14天之后的小鼠,症状减轻。组织病理学观察,在感染后7,14,21天,肝,脾,肺,肠和脑分别出现了不同程度的组织损伤,而仅对脑组织的损伤时持续性的。进一步通过免疫组织化学的方法,通过弓形虫抗体,Iba1, Brdu,CD68,标记观察不同日龄小鼠的脑组织中小胶质细胞的变化,发现在弓形虫感染后,引发了小鼠的弓形虫脑炎,致使脑中小胶质细胞的数量逐渐增多,感染14日龄,达到顶峰,然后,转为慢性脑炎,小胶质细胞的数量也有所下降。
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