论文部分内容阅读
植物在受到生物或非生物因子侵害时,会产生并积累活性氧,最终导致氧化胁迫。环境胁迫对植物组织培养同样也能产生重要的影响:其产生的活性氧对组织培养细胞中的核酸、蛋白、膜造成伤害。有效地控制活性氧的产生和清除机制,并对它们造成的伤害进行及时的修复,是组织培养细胞继续增殖的重要保障。同时,环境胁迫对植物体内的次生代谢物的累积也产生一定的影响。白藜芦醇作为葡萄次生代谢物的一种,因其具有明显抗菌、抗炎、抗癌、抗高血压脂症、抗脂质过氧化等多方面的生物活性,被人们所重视。然而,大多数有用的次生代谢物在植物细胞中含量极低,为此,在工业化生产中应需首先对植物细胞进行选育和改良,以提高植物细胞中次生物质含量。本文分别研究了不同浓度NaCl溶液,不同前体、外源物质添加与NaCl的联合作用,不同光质对葡萄愈伤组织生长及组织细胞中白藜芦醇积累的效应,旨在为获得遗传稳定的高产葡萄细胞系,为白藜芦醇的积累找出适宜的培养条件。本实验以“黑比诺”葡萄试管苗叶片诱导并继代1年的愈伤组织为试验材料,利用称重法称量,采用有机溶剂法提取,HPLC法分析测定,考察了不同浓度NaCl(0~0.4mol·L-1)培养;添加前体、外源物质与NaCl(0.3mol·L-1)联合作用;不同光质处理对生长周期中不同收获时间的葡萄愈伤组织生长及其中白藜芦醇生成量的影响。研究结果表明:1. NaCl浓度为0.3mol·L-1时,SOD活性最高,是对照的1.54倍,且在此NaCl浓度下白藜芦醇含量最高,达到80.76 ug·g-1(DW),相较于对照提高了15.7%,而较低浓度的NaCl则更有助于CAT活性的升高;2. NaCl与秋水仙素、苯丙氨酸的联合作用对细胞中POD、CAT活性影响较大,分别是对照的1.4和1.26倍,水杨酸、肉桂酸与NaCl相互作用降低了POD、CAT活性,外源添加β-环糊精对该愈伤组织细胞抗氧化酶影响不明显;苯丙氨酸、肉桂酸与NaCl的联合作用,可使单位干细胞白藜芦醇含量分别提高2.08和5.11倍,秋水仙素与NaCl联合处理后细胞中白藜芦醇含量提高了36.2%,而β-环糊精、水杨酸与NaCl联合作用对白藜芦醇无明显的促进作用;3.绿光显著提高细胞中SOD活性;黄光可提高POD、CAT活性,却明显降低细胞中MDA含量;红光、蓝光降低细胞中POD、CAT活性,几种光质对该愈伤组织中白藜芦醇的积累作用由强到弱依次为白光、黄光、蓝光、红光、绿光。绿光下白藜芦醇含量仅为41.6637 ug·g-1(DW),仅为白光处理的71.6%,黄光高出绿光1.37倍。