含糖聚合物纳米材料的制备及其在荧光和免疫增强方面的生物应用

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结构、组分可设计的含糖聚合物与蛋白质具有特异性多价相互作用,可用于模拟细胞间识别,细胞表面的寡糖分子与外界病原体的识别等诸多生物学事件,因此在新兴的糖生物学以及生命科学等领域扮演着重要角色。含糖聚合物功能化纳米材料由于其具有尺寸可调、极高的比表面积以及优良的生物相容性等优点,在生物材料领域得到了广泛地应用。本文通过可见光引发可逆加成-断裂转移(RAFT)自由基聚合的方法合成得到了一批具有不同单体组分的含糖聚合物,在此基础上,研究了功能化含糖聚合物纳米材料在荧光及免疫增强方面的生物应用:(1)我们首先以小分子单体2-甲基丙烯酰胺基葡萄糖(MAG)作为原料,通过光引发RAFT聚合制备得到三种不同分子量的含糖均聚物PMAG,经试验表明,该糖聚物以纳米簇的形式存在,具备一定的荧光发射性能,并展现出了良好的细胞成像能力,同时还具备优良的生物相容性。此外,通过改变糖聚物的组分来进一步实现荧光成像的多功能化应用,因此我们引入功能化第二单体甲基丙烯酸二乙基氨基乙酯(DEAEMA)以及甲基丙烯酸(MAA)分别与MAG共聚得到含糖共聚物P(MAG51-co-DEAEMA15)和P(MAG40-co-MAA172)。结果符合我们的预期,P(MAG51-co-DEAEMA15)中的叔胺基团质子化后增强了与大肠杆菌的结合,实现了对细菌的荧光成像检测,P(MAG40-co-MAA172)中的羧基电离后可与特定金属离子发生络合,基于部分金属离子的荧光淬灭作用可实现特定金属离子的定量检测。这类可调控结构的无传统发光基元的荧光含糖聚合物在生物多功能化成像应用方面具有广阔的应用前景。(2)我们以MAG和多巴胺甲基丙烯酰胺(DMA)为单体,利用光引发RAFT聚合的方法共聚得到了含糖共聚物(PDMA19-co-PMAG57)。然后以DMA作还原剂,氯金酸为氧化剂,CpG-NH2为免疫活性物质,利用一锅法将胺基封端的CpG和葡萄糖修饰到了金纳米粒子表面,通过纳米金表面的残余多巴胺分子的黏附作用和CpG与多壁碳纳米管(MCNT)和聚多巴胺球(PDA)间的π-π的多价作用力,我们合成得到了与细菌大小相仿的类细菌纳米材料。我们选取表面有大量模式识别受体的U937细胞作为研究对象,通过检测U937单核细胞极化成具有抗肿瘤活性的M1型巨噬细胞表面标志物的CD86表达水平用于评估类细菌纳米材料的免疫刺激活性,实验结果表明我们所合成得到的类细菌纳米材料具有增强的免疫刺激活性。
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