番茄在我国是一种广受欢迎的蔬菜,同时也是植物基因工程研究的一种模式植物。番茄病毒病是番茄生产上的重要病害之一,分布十分广泛,有近30种可侵染番茄的病毒,因此抗病毒研究成为番茄抗病育种的重要方面。病毒侵染寄主植物并在植物体内进行自我复制和增殖需要借助寄主自身的蛋白质合成机制。通过植物基因工程途径,干扰病毒利用植物mRNA翻译蛋白质的过程,可抑制病毒在植物体内的复制和增殖,不仅可获得抗病毒植物材料,而且可加深对植物.病毒互作分子机理的认识。通过研究发现真核翻译起始因子4E(eIF4E)及其异构体eIF(iso)4E在植物(番茄)与马铃薯Y病毒属(potyvirus)病毒互作中发挥极其关键的作用。本研究通过克隆真核翻译起始因子4E相关基因,利用农杆菌介导的转基因方法,在番茄常规品种中蔬六号(ZS6)上进行转基因研究,调控植物自身eIF4E和eIF(iso)4E的表达,提高植物对马铃薯Y病毒属病毒的抗性,探讨真核翻译起始因子4E相关基因介导的抗病毒特性的作用机理。获得的主要结果如下:1.以番茄常规品种中蔬六号(ZS6)为受体,通过农杆菌介导的方法用番茄eIF4E和eIF(iso)4E正义表达载体以及eIF4E和eIF(iso)4E反义表达载体进行遗传转化,获得eIF4E和eIF(iso)4E正义表达载体卡那霉素抗性植株各5株,未能获得eIF4E和eIF(iso)4E反义表达载体卡那霉素抗性植株。2.PCR检测结果表明,目标基因已经整合到番茄基因组中。所有的转基因番茄植株均能正常生长,开花结果。3.通过半定量RT-PCR对转基因植株进行了eIF4E和eIF(iso)4E表达分析,表明转基因植株中eIF4E和eIF(iso)4E得到超量表达。4.通过半定量RT-PCR对ZS6进行了eIF4E和eIF(iso)4E在不同组织中的表达分析,表明eIF4E和eIF(iso)4E在番茄植株不同组织中存在表达量的差异。5.利用汁液磨檫接种法对番茄转基因植株进行PVY病毒接种。通过对接种后的病毒病病情调查和病毒RNA的半定量RT-PCR分析,结果表明转基因植株相对于对照获得了不同程度的病毒抗性。其中转eIF4E基因的植株抗病毒的效果较差,而转eIF(iso)4E基因的植株抗病毒的效果较好。6.分析比较了接种PVY后不同时间内转基因植株和对照超氧化物歧化酶(SOD)的变化及其与抗病性的关系。