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目的:寻找一种适合于肺腺癌间变淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因检测的初筛方法,探讨肺腺癌间变淋巴瘤融合基因阳性率并分析其与临床特征的关系。方法:收集整理皖南医学院弋矶山医院病理科2014.1.1~2016.3.1日期间行病理检查且病理结果为肺腺癌并均已行ALK常规免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检查(一抗试剂采用1A4高亲和力抗体)病例181例(包括手术标本54例、CT引导下经皮肺穿刺活检或支气管镜活检标本122例、细胞蜡块标本5例)。试验分两部分,第一部分对54例手术标本先制作组织芯片,而后行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检查,以FISH作为ALK重排基因检测标准,分析手术标本免疫组化ALK(1A4)的敏感度和特异度,决定其是否适合作为肺腺癌ALK融合基因检测初筛方法。第二部分对所有患者ALK(1A4)结果为1+、2+、3+患者行FISH检查,分析肺腺癌患者ALK阳性率并分析影响其阳性率的相关因素。实验结果使用SPSS16.0统计软件中的χ2检验处理,分析ALK阳性率与年龄、是否转移、性别、是否抽烟、肿瘤临床分期、组织分化的相关性,当n≥40,1≤T<5,需使用连续校正公式计算χ2值,当n<40或T<1时,使用Fisher确切概率法分析,均以P<0.05认为有统计学意义。结果:已行ALK(1A4)检测的肺腺癌手术标本54例患者,其中男性31例,女性23例,男女比例为1.35:1;患者年龄最大88岁,最小32岁,平均年龄60.4岁;38例为Ⅰ期患者,13例为Ⅱ期患者,2例为Ⅲ期患者,仅1例为Ⅳ期患者;低分化21例,中分化32例,高分化仅1例;19例有吸烟史,35例无吸烟史。检测结果显示ALK(1A4)1+患者共6例,其中3例FISH(+),3例FISH(-);ALK(1A4)2+患者共3例,其中2例FISH(+),1例患者FISH(-);54例患者中未检测到ALK(1A4)3+病例;其余45例为ALK(1A4)-患者,FISH结果均为阴性。FISH检测结果显示手术病例肺腺癌ALK阳性率为9.3%。ALK(1A4)抗体敏感度为100%,特异度为91.8%。本实验所收集的181(包括手术标本54例、CT引导下经皮肺穿刺活检或支气管镜活检标本122例、细胞蜡块标本5例)例患者。103例男性患者共检出9例ALK基因重排阳性患者,重排发生率为8.7%,78例女性患者共检出11例ALK重排阳性患者,重排发生率为14.1%,两者比较结果并无统计学差异(P=0.2543)。入组患者年龄<60岁的是65例,ALK基因重排阳性者12例,重排发生率为18.5%;≥60岁者为116例,结果8例为ALK重排阳性者,重排发生率为6.9%,两者比较有统计学差异(P=0.0173)。入组患者中有128例有吸烟史,ALK基因重排阳性者9例,重排发生率为7.0%,53例患者无吸烟史,11例为ALK重排阳性者,重排发生率为20.8%,两者比较有统计学差异(P=0.0074)。57例出现转移的患者共检出4例ALK基因重排阳性患者,重排发生率为7.0%,124例无转移的患者共检出16例ALK重排阳性患者,重排发生率为12.9%,两者比较并无统计学差异(P=0.2407)。63例低分化腺癌患者,共检出3例ALK基因重排阳性患者,重排发生率为4.8%;115例中分化腺癌患者,共检出17例ALK重排阳性患者,重排发生率为14.8%;3例高分化腺癌患者,没有检出ALK重排阳性患者,三者比较并无统计学差异(P=0.1035)。Ⅰ期患者52例,共检出7例ALK基因重排阳性患者,重排发生率为13.5%;Ⅱ期患者34例,共检出6例ALK重排阳性患者,重排发生率为17.6%;Ⅲ期患者38例,共检出3例ALK基因重排阳性患者,重排发生率为7.9%;Ⅳ期患者57例,共检出4例ALK基因重排阳性患者,重排发生率为7.0%,四者比较并无统计学差异(P=0.3704)。ALK(1A4)检测结果为1+、2+、3+患者共计36例,其中有9例是手术标本,已做过FISH检测(5例ALK阳性),在这里就不重复做FISH检测。接下来的试验需要对27例ALK(1A4)检测结果为1+、2+、3+患者进行FISH检测,结果显示ALK(1A4)1+患者共17例,其中8例FISH(+),9例FISH(-);ALK(1A4)2+患者共10例,其中7例FISH(+),3例患者FISH(-);未检测到ALK(1A4)3+病例。最终FISH检测结果阳性患者共20例,阳性率为11.0%。结论:1、54例已行ALK(1A4)抗体检测的肺腺癌手术标本进行FISH检测结果显示,ALK(1A4)抗体敏感度为100%,特异度为91.8%,同时其敏感度、特异度与2013版ALK阳性NSCLC诊断专家共识推荐的5A4、D5F3抗体相似,因此ALK(1A4)抗体可以作为ALK融合基因阳性肺腺癌的初筛方法。2、181例患者FISH检测结果ALK重排阳性患者共20例,阳性率为11.0%,ALK基因重排多发生于不吸烟、较年轻(<60岁)的患者,而性别、肿瘤细胞分化、有无转移、临床分期与ALK基因重排无明显统计学差异(P>0.05)。