蜕膜化是子宫内膜转化为蜕膜的过程，是囊胚着床和维持妊娠所必需的。着床到月经发生的这一段时间(即LH峰后的7-14天)子宫内膜将作出决定：是继续蜕膜化还是剥脱、月经来潮。大约有50％的妊娠流产发生在这个时期，但是关于蜕膜化过程中的分子信号还不完全清楚。因此探讨蜕膜化的机制将有助于了解正常的着床过程，同时对临床上部分不孕病人及IVF中着床失败的病人也有帮助。FoxO1在蜕膜化过程中发挥重要作用。Buzzio等发现：FoxO1调节许多与蜕膜化相关基因的表达，如：IGFBP1、PRL、DCN、TIMP3和CNR1，同时转染FoxO1基因也能引起子宫内膜基质细胞发生蜕膜细胞样的形态学变化，FoxO1上调泌乳素(prolactin，PRL)基因启动子的活性，下调TIMP3基因启动子的活性。目前尚未发现有系统研究FoxO1蛋白在人月经周期各个时期的表达量及细胞定位，以及FoxO1在人妊娠早期的表达情况的报道，因此我们使用RT-Q-PCR、免疫组化和western blot检测FoxO1转录因子在人正常月经周期子宫内膜和早孕蜕膜中的表达。同时目前关于子宫内膜中调节FoxO1表达的因子研究得还比较少，因此我们研究了与体外蜕膜化有关的因子：cAMP、P、E和hCG与FoxO1表达的关系，以发现与FoxO1在子宫内膜基质细胞表达有关的调节因素，并初步探讨了其信号传递途径。第一部分转录因子FoxO1在人正常月经周期子宫内膜及早孕蜕膜中的表达目的：系统研究FoxO1在月经周期各个时期子宫内膜及早孕蜕膜中表达的规律及细胞定位。方法：采用RT-Q-PCR、免疫组化及western blot检测了因子宫肌瘤或宫颈上皮内瘤样病变而行子宫切除术的生育期妇女的子宫内膜组织39例(增殖期12例，分泌早期7例，分泌中期10例，分泌晚期10例)及12例蜕膜组织(来源于孕早期行人工流产的生育期妇女)中FoxO1的表达。结果：1、免疫组化发现：增生期FoxO1在上皮细胞中显胞浆弱阳性表达，间质细胞显阴性；分泌期早期FoxO1在上皮细胞的胞浆和核均阳性表达，分泌期中、晚期FoxO1在上皮细胞的胞浆和核均强阳性表达；分泌早、中期FoxO1在间质细胞的胞浆显阳性表达：分泌晚期间质细胞以核强阳性为主，在细胞浆中也有表达；在早孕蜕膜上皮细胞中胞浆和核均强阳性表达，间质细胞强阳性表达。2、RT-Q-PCR和western blot显示：各时相FoxO1的表达量，以早孕期表达量最高，分泌期较增生期增强，分泌中期和晚期的表达量与分泌早期相比显著增强，分泌中期与分泌晚期的表达量无差异。结论：FoxO1在子宫内膜的表达随月经周期动态变化，分泌中、晚期达高峰，在妊娠早期蜕膜中的表达进一步升高。第二部分FoxO1调节因素的研究及其在蜕膜化过程中的表达情况目的：研究cAMP、黄体酮、雌二醇和hCG与FoxO1表达的关系，以发现与FoxO1在子宫内膜基质细胞表达有关的调节因素。探讨FoxO1在体外蜕膜化过程中的表达情况。方法：采用RT-Q-PCR、细胞免疫组化和western blot检测cAMP、P、E和hCG对体外培养的人增生期子宫内膜基质细胞中FoxO1表达的调节作用，以及在体外蜕膜化过程中FoxO1的表达情况。结果：与对照组比较，黄体酮组、黄体酮+雌二醇组、hCG组子宫内膜基质细胞中FoxO1 mRNA的表达无差异(P＞0．05)。使用western blot，对照组、黄体酮组、黄体酮+雌二醇组、hCG组均未检测到FoxO1的表达。与对照组比较，cAMP组、cAMP+黄体酮组中FoxO1 mRNA和蛋白的表达明显增加(P＜0．05)：与cAMP组比较，cAMP+黄体酮组中FoxO1 mRNA和蛋白的表达也是增加的(P＜0．05)。cAMP组中FoxO1在基质细胞的细胞核中表达，cAMP+黄体酮组中FoxO1在基质细胞的细胞浆中表达。在cAMP导致的蜕膜化过程中，也伴随FoxO1在基质细胞中的表达。结论：黄体酮、黄体酮+雌二醇、hCG对体外培养的子宫内膜基质细胞中FoxO1的表达没有影响。FoxO1的表达受cAMP的调节；在cAMP存在的情况下，黄体酮对FoxO1的表达具有协同作用。蜕膜化过程中，也伴随有FoxO1在基质细胞中的表达。第三部分cAMP-PKA信号途径与FoxO1基因的表达目的：研究cAMP-PKA信号途径是否参与了FoxO1基因的表达。方法：使用PKA抑制剂H89，研究阻断cAMP-PKA信号途径后对cAMP、cAMP+黄体酮导致的FoxO1基因的表达的影响。结果：H89减少了cAMP、cAMP+黄体酮引起的FoxO1蛋白质的表达，(P＜0．05)。结论：cAMP-PKA信号途径参与了FoxO1基因的表达。