高效液相色谱法测定海水中多胺的研究

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本论文建立了海水中三种游离态多胺——腐胺、亚精胺和精胺的高效液相色谱测定方法。海水样品经高氯酸溶液酸化,丹磺酰氯衍生化,ODS色谱柱(150mm×4.6mm i.d., 5μm particle size, Agilent)分离,以0.1mol/L乙酸铵和乙腈作为流动相梯度淋洗,流速为1.0mL/min,荧光检测(激发波长:340nm;发射波长:515nm)。本实验中腐胺、亚精胺和精胺的最低检出限(S/N=3)分别为9.6×10-11、2.8×10-10和1.0×10-10mol/L。在1×10-9~1×10-7mol/L范围内,三种多胺的浓度和荧光信号值均呈良好的线性关系(R>0.99)。海水样品添加浓度在5×10-9、1×10-8、2.5×10-8和5×10-8mol/L的回收率为84.9~110.9%,荧光检测的相对标准偏差<2.5%,本方法中多胺衍生物不需要用有机溶剂反复提取,衍生后可直接进样分析,避免了萃取中多胺的损失,也极大的提高了分析速度。本方法具有选择性高,样品用量少,灵敏度好等特点,适合海水中游离态腐胺、亚精胺和精胺的痕量分析。实验室培养东海常见的五种赤潮硅藻(中肋骨条藻、旋链角毛藻、柔弱角毛藻、双突角毛藻和三角褐指藻),采用上述高效液相色谱法测定硅藻不同生长时期海水中游离态多胺含量,结果表明藻类在生长后期海水中2-苯基乙胺、腐胺和亚精胺浓度有显著的增加。使用高效液相色谱法测定2009年5月东海表层海水和底层海水中四种溶解游离态多胺(2-苯基乙胺、腐胺、亚精胺和精胺)的含量,结果表明,33个站位的表层海水中2-苯基乙胺的浓度范围为4.25~276.64nmol/L;腐胺的浓度范围为0.12~112.67nmol/L;亚精胺的浓度范围为1.15~19.50nmol/L;精胺的浓度范围为2.82~10.70nmol/L。2-苯基乙胺和腐胺是主要的多胺类物质。cb断面表层海水中四种多胺的浓度均略高于底层海水四种多胺的浓度。使用高效液相色谱法测定东海春季赤潮消亡后,表层、10m层和底层海水中四种溶解游离态多胺组成和浓度。结果表明,海水中2-苯基乙胺的浓度范围为27.54~75.96nmol/L;腐胺的浓度范围为14.50~59.56nmol/L;亚精胺的浓度范围为0.11~0.73nmol/L;精胺的浓度范围为3.30~6.71nmol/L。2-苯基乙胺和腐胺是主要的多胺类物质。
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