第一部分：TNF-alpha和microRNA155在幼鼠MTLE模型癫痫持续状态后及内侧颞叶癫痫患儿中的表达目的：近年来,炎症反应在内侧颞叶癫痫(Mesial temporal lobe epilepsy, MTLE)中的作用备受关注,microRNAs (miRs)作为MTLE发病机制的一个重要参与者逐渐被人们认识。本研究中,我们观察了在幼鼠MTLE模型和儿童MTLE患者海马组织中肿瘤坏死因子a(TNF-α)和microRNA-155(miR-155)的动态表达改变,并在体外培养的星形胶质细胞中证实它们之间的直接相关性。方法：氯化锂-匹罗卡品诱导幼大鼠MTLE模型,运用蛋白质印迹和实时荧光定量PCR等方法来检测大鼠海马中TNF-α和miR-155的表达。分别检测MTLE急性期、潜伏期和慢性自发发作期(分别为癫痫持续状态后的2h、3w和8w)TNF-α及miR-155的表达情况。用同样的方法检测MTLE患儿海马及正常对照组海马组织中TNF-α和miR-155表达变化。在体外培养的星形胶质细胞中,采用实时荧光定量PCR法检测MRP8、 LPS分别刺激后以及来那度胺抑制TNF-α后TNF-α和miR-155的表达变化。结果：TNF-α和miR-155在幼大鼠MTLE模型中抽搐相关的急性期及慢性期表达明显上调,同时在MTLE患儿海马组织中表达也增高。通过MRP8、 LPS刺激或者来那度胺抑制fNF-α表达,星形胶质细胞中TNF-α及miR-155表达出现动态一致性改变。结论：首次研究了在氯化锂-匹罗卡品诱导的幼大鼠MTLE模型和儿童MTLE患者中miR-155的表达情况,并在细胞水平证实它与TNFα表达的直接相关性。在MTLE发展的三个阶段,TNF-α和miR-155的表达改变相似,且在星形胶质细胞水平上的表达一致高度提示他们在MTLE发展过程中的直接相关性。因此,对TNF-α的miR-155轴的调节可能是MTLE治疗的一个新的靶点。第二部分：MRP8、LPS、来那度胺对原代培养星形胶质细胞TNF-a及脑组织富含的炎症相关的microRNAs表达的影响目的：星形胶质细胞是一种特殊的胶质细胞,数量是神经元细胞的5倍以上,在生理和病理情况下,与中枢神经系统(CNS)功能密切相关。microRNAs (miRNAs)是一类调节蛋白编码基因转录后表达的非编码RNA,可能对各种因素诱导的星形胶质细胞激活有重要作用。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测MRP8、LPS刺激星形胶质细胞后脑组织富含的miRNAs(124,134,132,138)和炎症相关的miRNAs(146a,181a,221,222)以及TNF-a的表达变化。然后,采用TNF-a抑制剂来那度胺抑制星形胶质细胞TNF-a表达,了解这种抑制效应对上述脑组织富含的及炎症相关的miRNAs的表达的影响。结果：MRP8或LPS刺激星形胶质细胞后,miRNAs(124,134,9,132,146a,21,181a,221和222)表达显著上升,miR-138表达下降。来那度胺预处理后miRNAs (124,134,9,132,146a,21,181a,221和222)表达减少,miR-138表达增加。结论：脑组织富含的、炎症反应相关的miRNAs表达在促炎性刺激因子及TNF-a抑制剂引起的星形胶质细胞活化时出现明显改变。这些miRNAs对星形胶质细胞的活化可能起重要作用。第三部分：炎症反应相关的miR-181a, miR-221和miR-222在幼鼠MTLE模型和儿童内侧颞叶癫痫中的动态变化目的：越来越多的临床和实验证据表明神经炎症反应与癫痫形成密切相关。最近,miRNAs开始成为成人及发育中大脑内侧颞叶癫痫(MTLE)发病机制的一种新的参与者。本研究旨在探讨幼鼠MTLE模型发展的3个时期及儿童MTLE患者海马中炎症相关的miR-181a、miR-222的动态表达改变。方法：实时荧光定量PCR分别检测MTLE大鼠模型急性期、潜伏期和慢性自发发作期(分别为氯化锂-匹罗卡品诱导癫痫持续状态后的2h、3w和8w)的miR-181a、miR-221和miR-222的动态表达变化,对照组大鼠海马组织取相同的时间点检测。用同样的方法检测儿童MTLE患者和正常对照组海马miR-181a、miR-221和miR-222的表达改变。结果：miR-181a的表达在MTLE大鼠模型急性期下调,潜伏期几乎与对照组相等,慢性期表达增加。miR-221和miR-222在3期表达均下降。在MTLE患儿,miR-181a的表达显著上调,而miR-221和miR-222表达下降。结论：首次研究了大鼠脑组织中炎症反应相关的miR-181a、miR-221和miR-222在幼鼠MTLE模型和儿童MTLE患者的不同表达变化。