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背景与目的卵巢癌是妇科常见的三大恶性肿瘤之一,近年来随着科技的不断进步,卵巢癌的检测方法已有了突飞猛进的改进,但由于卵巢位于盆腔深处,早期发病隐匿不易察觉,一旦出现症状往往已属于中晚期,患者常常丧失了最佳手术时机,故卵巢癌的死亡率现居妇科各类肿瘤之首。找到与卵巢癌发生、发展关系密切的生物学指标,探纠其为何会导致卵巢癌发生、侵袭的内在作用机制,提高卵巢癌的早期诊断率,以找出遏制肿瘤复发、转移的良策迫在眉睫、至关重要。中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)是Kjeldsen等1993年研究中性粒细胞中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9MMP-9)时发现的一种新蛋白,县Lipocalin家族的一个新成员。研究发现NGAL在炎症性疾病和多种肿瘤中表达上调,是近年来医学领域的一个新热点。MMP-9可降解细胞外基质和基底膜并影响组织的重塑,从而促进肿瘤的侵袭和转移。此外,多项研究表明NGAL和MMP-9的功能密切相关。本实验通过半定量RT-PCR方法和ELISA法检测卵巢上皮性癌组织及血清中NGAL和MMP-9在卵巢癌中的表达情况,以了解二者与卵巢癌临床病理特征之间的关系,并探讨卵巢癌中NGAL与MMP-9表达的相关性。材料与方法1研究对象：选取2010年1月-2011年2月郑州大学第一附属医院收治入院的病人89例,按性质分为3组：其中卵巢上皮性癌50例(浆液性癌31例,黏液性癌19例,其中按国际妇产科联盟(FIGO)2000年临床分期标准分期：ⅠⅡ期17例、Ⅲ-Ⅳ期33例,患者年龄38-72岁,中位年龄53.5岁)；良性上皮性卵巢肿瘤21例(浆液性囊腺瘤15例、黏液性囊腺瘤6例,患者年龄28-67岁,中位年龄48岁)；选择同期在我院妇产科因子宫肌瘤手术切除的18例患者的正常卵巢组织及血液标本作为对照(患者年龄43-61岁,中位年龄47.5岁)。三组病例年龄无统计学差异(P>0.05)。入选病例均排除其他肿瘤病史,术前均未接受放、化疗,取材前均征得患者知情同意,术后均经病理科确诊。患者于术前抽取空腹静脉血4m1,置于未加抗凝剂试管,室温下静置30min,4℃下3000r/min离心15min,取上清置于EP管-80℃冰箱保存。术中切取卵巢部分组织在0.5h内迅速移入-80℃冰箱保存,用于提取mRNA做半定量RT-PCR。所有标本避免反复冻融。2试验方法：应用酶联免疫吸附法(ELISA)和半定量逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测卵巢上皮性癌、良性上皮性卵巢肿瘤、正常卵巢的组织及血清标本中NGAL和MMP-9基因的表达情况。3统计学分析：采用SPSS17.0统计软件进行数据的处理与分析,对资料进行t检验、K-S检验和K-W检验,采用Pearson分析数据相关性。a=0.05为检验水准。结果1RT-PCR结果：卵巢上皮性癌组织NGAL mRNA和MMP-9mRNA表达水平分别为(0.747±0.146,0.625±0.144),两者均显著高于在卵巢良性肿瘤组织中的表达(0.442±0.155,0.312±0.064)及卵巢正常组织中的表达(0.121±0.037,0.111±0.042),差异均有统计学意义(P均<0.05)。Ⅰ-Ⅱ期卵巢癌患者组织中二者的表达水平分别为(0.684±0.179,0.528±0.136),与Ⅲ-Ⅳ期患者(0.779±0.116,0.676±0.124)相比差异均有统计学意义(P<0.05)。NGAL mRNA和MMP-9mRNA在有淋巴结转移组的表达分别为(0.806±0.073,0.699±0.109),在无淋巴结转移组的表达分别为(0.678±0.179,0.539±0.132),差异有统计学意义(P均<0.05)。NGAL mRNA在高、中、低分化癌中的表达分别为(0.824±0.065,0.770±0.064,0.620±0.221),差异有统计学意义(P均<0.05),MMP-9mRNA则在高、中、低分化癌中的表达分别为(0.505±0.142,0.635±0.111,0.715±0.120),差异有统计学意义(P均<0.05)。2ELISA结果：卵巢上皮性癌患者血清中NGAL和MMP-9水平分别为(44.799±8.723,39.925±7.455)ng/ml,两者均显著高于在卵巢良性肿瘤患者血清中的水平(31.944±4.190,35.321±8.759)ng/ml及正常对照组血清中的水平(17.787±2.655,24.176±3.405)ng/ml,差异有统计学意义(P均<0.05)。ⅠⅡ期卵巢癌患者血清中二者的水平分别为(40.434±7.642,36.834±6.988)ng/ml,与Ⅲ-Ⅳ期患者血清中的水平(47.048±8.484,41.519±7.279)ng/ml相比差异有统计学意义(P<0.05)。NGAL和MMP-9在有淋巴结转移组患者的血清中的水平分别为(47.280±8.523,41.537±7.273)ng/ml,在无淋巴结转移组的水平分别为(39.985±7.110,36.799±6.9761)ng/ml,差异有统计学意义(P均<0.05)。NGAL在高、中、低分化癌患者血清中的水平分别为(48.535±8.520，44.907±9611，40.319±5.125)ng/ml,差异均有统计学意义(P均<0.05)。MMP-9则在高、中、低分化癌患者血清中的水平分别为(37.625±7.197,38.639±7.748,43.808±6.033)ng/ml,差异有统计学意义(P均<0.05)。3相关分析：经Pearson相关分析发现,卵巢上皮性癌组织中NGAL mRNA和血清中NGAL水平呈正相关(r=0.762,P<0.05),卵巢上皮性癌组织中MMP-9mRNA和血清中MMP-9水平呈正相关(r=0.601,P<0.05),卵巢上皮性癌组织中NGAL mRNA和MMP-9mRNA表达呈正相关(r=0.740,P<0.05),卵巢上皮性癌血清中NGAL和MMP-9水平呈正相关(r=0.676,P<0.05)。结论1NGAL和MMP-9的表达上调与卵巢上皮性癌的恶性生物学行为关系密切。2NGAL和MMP-9在卵巢癌的发生、侵袭及转移中可能具有协同作用。3检测血清NGAL和MMP-9水平可能对于鉴别良、恶性肿瘤具有重要意义。