论文部分内容阅读
淀粉具有来源广泛、价格低廉、生物相容性、生物可降解性等优点被广泛应用于生物医学领域中,又因为其分子内部含有大量的亲水基团的羟基可供修饰,本研究将可溶性淀粉经过疏水化学修饰后制备一种两亲性的自组装核-壳式纳米聚合物胶束作为抗肿瘤药物靶向输送载体。淀粉在催化剂作用下与疏水配基生物素、肝癌细胞靶向配基甘草次酸进行酯化反应得到的甘草次酸-生物素-淀粉(GBS)聚合物,该两亲性聚合物在水溶液中能够自组装成一种具有核-壳结构的球形纳米粒。运用核磁共振研究GBS纳米粒的化学结构信息,结果显示生物素和甘草次酸已经成功地连接在淀粉上,通过透射电子显微镜观察到GBS纳米粒的形状近似为球形,激光动态光散射分析结果表明该纳米粒粒径范围为89-144nm,平均粒径约122 nm,荧光探针法测得其临界聚集浓度为31.8μg/mL。疏水性抗肿瘤化疗药物阿霉素通过物理方式包载到GBS纳米载体中,当载体/药物比值为20-100时,测得该纳米载体的最高载药量和包封率是3.6%和93.4%。在不同的pH(pH5.29,6.47,7.38)磷酸盐缓冲液中载药纳米粒的DOX累计释放量表明随着缓冲液pH值的增加,药物释放速度随之减慢,在中性环境中阿霉素的释放速度较酸性条件下释放的速度慢,说明该纳米粒能在肿瘤组织的酸性环境中促进药物的释放。以HepG2细胞为研究对象通过MTT实验检测空白纳米载体的细胞毒性和载药纳米粒的细胞半致死浓度。实验结果表明空白GBS纳米载体对于HepG2细胞的生长基本没有影响,游离DOX的细胞半致死浓度为6.2μg/mL,DOX/BS纳米粒的细胞半致死浓度为3.9μg/mL,DOX/GBS纳米粒的细胞半致死浓度为1.3μg/mL,三者中DOX/GBS纳米粒的细胞半致死浓度最小,说明GBS纳米粒对甘草次酸受体(GA-R)表达的肿瘤细胞具有靶向作用,DOX/GBS纳米粒具有明显的细胞毒性作用。通过激光共聚焦扫描显微镜观察游离DOX和DOX/GBS纳米粒进入细胞的方式是不同的,游离阿霉素是以被动扩散的形式进入细胞,而载药纳米粒则是通过胞吞的形式进入,GBS纳米粒的靶向作用明显提高HepG2细胞摄取药物量。以上结果表明GBS纳米粒能有效包载抗肿瘤药物并实现靶向输送,减少对正常细胞的毒副作用,该纳米药物载体的研究应用具有良好的前景。