论文部分内容阅读
研究背景口腔种植修复作为固定修复的一种,是主要用于治疗牙列缺损、缺失的方法,也是目前临床上越来越多患者的选择。但常由于患者颌骨骨量不足而无法进行种植修复。需通过手术增加骨量,创造种植修复的条件。因此选择短时间增加骨量,且安全又可靠的骨替代材料是关键。此外,增加骨替代材料的成骨性能便成为解决这一问题的研究热点。Mundy等发现辛伐他汀正是具有这样促进成骨分化的效能。研究目的本项目在前期具有自主知识产权的新型多孔羟基磷灰石(HA)陶瓷支架的研究成果基础上,继续探讨此型多孔HA陶瓷支架的骨化机制,以及三种不同条件构建的骨组织工程在3个不同时间点的成骨分化对比研究。研究方法1、应用薄膜分散法制作载辛伐他汀(SIM)的纳米脂质体,并通过粒径仪测其粒径和多分散系数。2、通过使用透析装置进行的缓慢释放实验,用UV2100紫外可见分光光度计测量载辛伐他汀的纳米脂质体和单纯辛伐他汀药物溶液在1d、2d、3d、5d、7d、14d的释放情况,并绘制释放曲线直观反应SIM缓释微球和单纯SIM溶液在这些时间点释放差异情况的对比。3、将人胎盘来源的间充质干细胞(hPMSCs)作种子细胞,新型多孔羟基磷灰石陶瓷作支架,在三种不同情况下构建的组织工程分别培养7 d、14 d、21 d后进行转录组基因水平检测,再通过western blot和荧光定量PCR反向验证基因水平检测的结果。研究结果1、载SIM纳米脂质体平均直径为77.27nm,多分散系数PDI值0.131,说明此SIM纳米脂质体直径属于容易被细胞摄取的范围,且大小均匀。2、通过缓释实验证明SIM纳米脂质体可以达到至少14天持续缓慢释放药物,而单纯SIM溶液在短短3天就几乎全部释放。3、3.3μmol/L浓度的SIM,在一定程度上抑制了VEGF和BMP-2的表达,而对BMP-4的表达有一定促进作用。4、在无SIM或有3.3μmol/L SIM干预时,VEGF的表达晚于BMP-4和BMP-2。在3.3μmol/L SIM干预过的细胞,再构建骨组织工程后,VEGF和BMP-4、BMP-2几乎同时表达。