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Ezrin/Radixin/Moesin是一组高度同源蛋白,统称为ERM,是近年来肿瘤相关蛋白研究领域中的热点。ERM蛋白大多位于丝状突和膜的伸展部位,其基本功能是将肌动蛋白栓系到细胞膜和锚定到膜蛋白的特定部位上,这样可维持细胞膜表面的一些特殊结构,如微绒毛和细胞膜突起。除此之外,ERM蛋白还参与细胞表面粘附分子的定位,通过细胞与细胞,细胞与基质之间的相互作用参与细胞粘附作用,ERM蛋白还是酪氨酸激酶的受体,并通过RhoGTP酶参与信号转导,同时参与Akt介导的细胞凋亡机制。因此,ERM蛋白通过维持细胞的基本形态和运动而与肿瘤的发生发展特别是侵袭转移密切相关。 本课题组以往研究发现,具转移特性的SHEEMT食管癌细胞Ezrin表达水平显著高于其前体不具转移特性的SHEEIMM永生化食管上皮细胞Ezrin表达水平。然而,到目前为止,关于ERM蛋白在食管癌组织中的表达情况以及其与患者的临床及病理资料如病理分级、临床分期及淋巴结转移之间的相关性还未见报道,因此本课题在原有工作基础上,对食管癌临床样本中Ezrin的表达模式进行了研究,并且检测了ERM家族中另外两个成员的表达情况,以期对该家族成员在食管癌发生发展中的作用有更广泛和进一步认识。 内容与方法: 1.收集89例食管组织石蜡样本,包括40例食管癌组织、42例切缘食管粘膜组织及7例食管卷片蜡块,用免疫组织化学方法检测Ezrin的表达及其定位情况。 2.用western blot方法检测新鲜食管癌及其切缘食管粘膜组织中的Ezrin、Radixin、Moesin和PCNA蛋白的表达水平。 3.以β-actin为内参照,用荧光定量RT-PCR检测新鲜食管癌及其切缘食管粘膜组织中Ezrin基因的mRNA水平。 结果: 1.免疫组织化学结果显示,Ezrin在切缘食管粘膜细胞中主要分布在胞膜,而在高分化食管癌组织中,胞浆和胞膜均出现Ezrin阳性信号,在中分化食管癌组织中,Ezrin则弥散分布于胞浆中。 2.Western blot结果显示在49例配对样本食管癌组织中,有13例样本Ezrin表达上调,占26.5%;另外36例Ezrin表达下调,占73.5%。 3.荧光定量RT-PCR结果显示癌组织与切缘食管粘膜组织相比,Ezrin基因mRNA的水平有显著性差异(P<0.05),且切缘组织中Ezrin基因mRNA的相对拷贝数是癌组织