斜带石斑鱼胰岛素样生长因子cDNA的克隆和序列分析及表达

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在胰岛素基因家族中,胰岛素样生长因子IGFs是一类具有促细胞分裂效应的蛋白类激素,因其结构与胰岛素原相类似而得名.采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法和cDNA末端快速扩增技术(RACE),从斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)肝组织总RNA中扩增IGF-I基因的中间片段、3端片段和5端片段,对它们进行了核苷酸序列分析,并将三个片段进行拼接,得到IGF-不cDNA全长序列,并推导出其编码的蛋白质序列,共为186个氨基酸,成熟肽为68个氨基酸.将斜带石斑鱼IGF-I前蛋白原氨基酸序列与黑鲷序列进行比较,发现两者信号肽的氨基酸序列安全相同,而在B、C、A、D和E五个区域中两种鱼核酸的同源性高达97.3﹪,差异主要分布在B和C区.E区域分析结果表明斜带石斑鱼IGF-I序列属于Ea-4亚型.运用分析软件,将斜带石斑鱼IGF-I的氨基酸序列与其它脊椎动物进行同源性比较,并构建出进化树,结果都显示斜带石斑鱼IGF-I与同目的黑鲷、鲽形目的牙鲆和鲀形目的河豚的亲缘性较高,与哺乳类的人和鼠类的亲缘性较低.
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