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目的：通过采不同检测系统测定不同肌酐浓度水平的冰冻人血清样本及不同厂家的冰冻质控样本中的肌酐浓度，观察不同检测系统及不同材料样本测定结果的离散度，同时以Beckman原装配套检测系统的测定结果为基准，观察其他检测系统测定结果的偏差。完善以5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil，5-Fu)为内标的反相高效液相色谱(Reversed-Phase High-Performance LiquidChromatographic Assay，HPLC)测定人血清肌酐的方法，评价其不精密度和不准确度，并以HPLC为标准，评价几种人血清肌酐常规测定方法的准确性。
方法：首先由北京市临床检验中心以现场调查的方式向参加调查的13家实验室(31套检测系统)发放添加不同浓度肌酐标准液的冰冻混合人血清样本8支，纯冰冻混合人血清样本8支，不同厂家冰冻质控样本6支，按照各实验室标准操作程序进行测定。同时改进血清肌酐的HPLC测定法，此法以反相C18为固定相，5-Fu为内标，于235nm处进行检测。在肌酐的常规测定方法中，Beckman LX20测定系统采用血清肌酐Jaffé动力学法，强生Vitros250测定系统采用干化学法，酶法采用协和酶法试剂盒，在Hitatchi7170全自动生化分析仪上进行测定。
结果：对于添加不同浓度肌酐标准液的冰冻混合人血清样本，各检测系统间肌酐结果的变异范围在5.74％～9.68％之间；对于纯冰冻混合人血清样本，各检测系统间肌酐结果的变异范围为5.90％～11.69％。在以Beckman原装配套检测系统测定结果为基准的比较中，当血清肌酐浓度＜150μmol/L时，采用苦味酸法的其他检测系统显示正偏差，且随浓度降低正偏差增大，最大达到+7.81％，而在血清肌酐浓度＞150μmol/L时，结果显示负偏差，最大达到-8.93％，；酶法检测系统测定的所有浓度范围肌酐的结果均为负偏差，最大可达到-8.88％，在测定的冰冻质控样本结果中，对于所有检测系统和其中应用碱性苦味酸法的检测系统，其结果间的变异除Q1外，均在10％以内，酶法与碱性苦味酸法相比，在低值尤其是＜70μmol/L时，检测结果明显偏低，与Beckman原装配套检测系统的偏差达到-35.67％。非原装配套检测系统测定所有样本结果的变异均明显大于Beckman原装配套检测系统。对于HPLC法，日内不精密度(n=5)＜2.0％，日间不精密度(n=20)＜5.1％。绝对回收率＞95.31％，相对回收率＞98.95％。不同肌酐浓度有证参考物质的测定值与靶值基本一致，平均偏差-0.31％～1.35％。同时以HPLC法作为独立变量，肌酐浓度＜200μmol/L时，Beckman LX20系统、强生干化学系统及酶法的偏差分别为-19％～+21％、-14％～+21％和-30％～+11％：肌酐浓度＞200μmol/L时，Beckman LX20系统、强生干化学系统及酶法的偏差分别为-10％～+13％、-13％～+14％和-20％～+10％，其中酶法结果基本为负偏差，在肌酐浓度＜70μmol/L时，有的负偏差达到-30％。
结论：调查结果显示由于测定方法不统一以及检测系统不一致等原因，血清肌酐测定结果的室间差异较大，因此有必要建立肌酐测定的候选参考方法，并对此方法的性能进行验证，使其达到参考方法的标准，使肌酐测定达到标准化，并利用其对临床常规测定方法进行评价，以提高常规实验室血清肌酐测定的准确度，使结果有可比性。对于5-Fu为内标的HPLC法，其不精密度和不准确度好，基本达到候选参考方法的要求，Beckman LX20和强生干化学测定系统与HPLC法的偏差相对较小，酶法测定结果系统偏低，且当血清肌酐浓度＜70μmol/L时不能准确测定。