论文部分内容阅读
课题组前期的研究结果表明,甲亢性心脏功能变化与心磷脂关系密切,本研究拟从GLUT4(Glucose transporter4,葡萄糖转运蛋白4)变化的角度进一步探讨心磷脂在甲亢中的作用。 心脏作为一个高能量代谢的组织,主要通过线粒体中氧化磷酸化产生ATP来提供能量,并且对葡萄糖体现出高度依赖性。而GLUT4是糖转运体蛋白家族中的一员,在葡萄糖的非ATP-依赖膜转运过程中起着重要作用。因此,对于以高代谢为主要变化的甲亢,探讨GLUT4是有必要的。而且,文献报道甲状腺激素可促进心肌组织中GLUT4[3]的表达,进而促进对葡萄糖的利用[1,2]来满足心脏基础代谢率升高对能量的需求[4,5]。但是,GLUT4只有从胞浆中转移到细胞膜上才能介导葡萄糖的转运过程,因此,本研究拟进一步探讨:(1)细胞膜上GLUT4的含量以及细胞中GLUT4的分布在甲状腺激素作用下会有怎样的变化。(2)CLS(cardiolipin synthetase,心磷脂合酶)低表达是否对上述变化有影响。(3)CL(cardiolipin,心磷脂)中脂肪酸的饱和度不同是否对上述GLUT4的变化有影响。 研究结果如下: (1)在体和离体实验结果显示:T4作用下心室和H9c2细胞GLUT4在蛋白和基因水平的表达增加,表明:T4可促进心室和H9c2细胞中GLUT4表达。 (2) HA-GLUT4 H9c2细胞体外T4处理,通过激光共聚焦手段获得荧光图像并统计学分析结果显示:T4作用下细胞膜上GLUT4的含量增加,并且在细胞膜上的相对分布水平提高。表明:T4可促进H9c2细胞中GLUT4在细胞膜上的含量和其在细胞膜上的相对分布量。 (3) H9c2细胞体外给药CL(14∶0/18∶1/18∶2)实验结果显示:CL作用下H9c2细胞中GLUT4在蛋白和基因水平的表达增加。表明:CL可促进H9c2细胞中GLUT4的表达。 (4) HA-GLUT4 H9c2细胞体外CL(14∶0/18∶1/18∶2)处理,通过激光共聚焦手段获得荧光图像并统计学分析结果显示:CL作用下H9c2细胞膜上GLUT4的含量增加,并且在细胞膜上的相对分布水平提高。表明:CL可促进H9c2细胞中GLUT4在细胞膜上的含量和其在细胞膜上的相对分布量,并且不同饱和度CL作用之间不存在显著差异。 (5)CLS低表达的HA-GLUT4 H9c2细胞加入T4处理的同时加入外源性心磷脂进行处理,结果表明:T4作用下CLS低表达的H9c2细胞中GLUT4在细胞膜上的分布显著降低,加入外源性心磷脂后未出现明显改善。 综上所述结果表明:甲亢引起的心脏代谢增强与过量甲状腺激素导致的机体高代谢有关;而T4可引起心肌组织中GLUT4表达增加和在细胞膜上分布增加,并且这一现象与心磷脂存在一定的联系。