四种橐吾属植物生物碱成分和营养成分分析及其毒性评价

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong451
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菊科橐吾属(Ligularia)植物纳里橐吾(Ligularia naryensis)、黄帚橐吾(Ligularia virgaurea)、箭叶橐吾(Ligularia sagitta)和盘状橐吾(Ligularia discoidea)是一种多年生的草本植物,作为一种优势群落,在我国的、四川、西藏、新疆、青海、甘肃等草原牧区的天然退化草地已经形成,作为一种有毒植物对草地家畜的健康养殖和生态安全存在着潜在的危害。目前,关于4种橐吾的研究较为丰富多样,但是有关其生物碱成分及其毒性研究尚属空白。本文对采自新疆、青海、甘肃和西藏天然草地的纳里橐吾、黄帚橐吾、箭叶橐吾和盘状橐吾地上部分全草进行生物碱成分和营养成分分析,并对其各提取部位进行体内和体外毒性研究,初步阐明4种橐吾地上部分所含生物碱种类及其主要毒性成分,并分析评价其所具营养价值的高低,不仅丰富了各橐吾属植物研究内容,也为橐吾属植物毒理学研究及其开发利用提供基础支持,本试验取得结果如下:1.化学成分系统分析:采用纸薄层法和试管法对4种橐吾进行检测,初步确定4种橐吾共同含有的化学成分包括挥发油(Volatile oil)和油脂(grease)、生物碱(Alkaloids)、鞣质(Tannins)、有机酸(Organic acid)、氨基酸(Amino acid)、肽(Peptides)和蛋白质(proteins)、糖类(carbohydrate)、黄酮类(Flavonoids)、香豆素(Coumarin)和萜类内酯(Terpenoids)、酚类化合物(Phenolic compounds)。此外,纳里橐吾还含有醌类(Quinones);箭叶橐吾还含有甾体(Steroids)和三萜类(Triterpenes)、强心苷类(Cardioside)、醌类(Quinones);黄帚橐吾还含有甾体(Steroids)和三萜类(Triterpenes);盘状橐吾还含有甾体(Steroids)和三萜类(Triterpenes)、醌类(Quinones)。2.生物碱提取分离与鉴定:本试验采用植物化学成分传统提取法对4种橐吾地上部分生物碱进行提取分离、薄层色谱分析和GC-MS检测,结果显示:纳里橐吾酸性二氯甲烷部分提取率为2.00%,碱性二氯甲烷部分提取率为0.05%,碱性正丁醇部分提取率为0.76%;薄层色谱分析分别出现1个、5个和1个生物碱识别标志。经GC-MS检测并与数据库进行对比分析鉴定出2,4-dimethylpyrrole、Heliotridine、Caulophylline、Sophoranol和Sophoramine等5种生物碱;箭叶橐吾酸性二氯甲烷部分提取率为0.80%,碱性二氯甲烷部分提取率为0.16%,碱性正丁醇部分提取率为2.54%,薄层色谱分析出现1个、4个和0个生物碱识别标志。经GC-MS检测并与数据库进行对比分析鉴定出1-Pyrrolidinecarbaldehyde和2-Pyrrolidinone等2种生物碱;黄帚橐吾酸性二氯甲烷部分提取率为1.80%,碱性二氯甲烷部分提取率为0.02%,碱性正丁醇提取率为3.20%,薄层色谱分析出现0个、5个和1个生物碱识别标志。经GC-MS检测并与数据库进行对比分析鉴定出Senecionine、Integerrimine和Platyphylline等3种生物碱;盘状橐吾酸性二氯甲烷部分提取率为4.00%,碱性二氯甲烷部分提取率为0.08%,碱性正丁醇部分提取率为3.20%,薄层色谱分析出现0个、5个和0个生物碱识别标志。经GC-MS检测并与数据库进行对比分析鉴定出2-Pyrrolidinone、Benzothiazole、Benzothiazolone、Senecionine、Integerrimine和Platyphylline等6种生物碱。3.小鼠急性毒性试验:为了研究4种橐吾醇浸膏的毒性强弱,对小鼠进行了口服染毒,结果如下:纳里橐吾、箭叶橐吾、黄帚橐吾和盘状橐吾醇提液小鼠口服LD50分别是4.50 g/kg(95%可信限为3.65-5.47 g/kg)、8.30 g/kg(95%可信限为7.75-8.89 g/kg)、9.28 g/kg(95%可信限为8.49-10.15 g/kg)和9.28 g/kg(95%可信限为8.03-10.72 g/kg)。结合小鼠临床症状和剖检变化,分析认为纳里橐吾、黄帚橐吾、箭叶橐吾和盘状橐吾均具有毒性,毒性排序纳里橐吾>箭叶橐吾>盘状橐吾>黄帚橐吾。4.细胞毒性评价:采用CCK-8法检测4种橐吾地上部分5个萃取部位浸膏对BRL-3A和TCMK-1细胞毒性作用,结果显示:4种橐吾均碱性二氯甲烷部位对BRL-3A和TCMK-1细胞毒性最强,其次分别是二氯甲烷部位(纳里橐吾)、石油醚部位(黄帚橐吾)、正丁醇部位(箭叶橐吾)、石油醚和碱性正丁醇部位(盘状橐吾)。结果表明不同化学部位对两种细胞的毒性不同,尤以碱性二氯甲烷部位毒性最强,证明碱性二氯甲烷部位是4种橐吾属植物的主要毒性部位。5.营养成分分析:按照国家标准法对4种橐吾地上部分全草营养成分进行检测,结果显示:纳里橐吾粗蛋白、粗脂肪和粗纤维含量分别为0.87%、3.26%和43.63%。矿物质元素钙、磷、镁、锌、硒、铁、铜和锰含量分别为7622 mg/kg、1960 mg/kg、9383 mg/kg、38.11 mg/kg、0.09 mg/kg、744.50 mg/kg、9.07 mg/kg和6.34 mg/kg。含17种氨基酸,总含量7.43%;黄帚橐吾粗蛋白、粗脂肪和粗纤维含量分别为6.09%、3.77%和26.40%。矿物质元素钙、磷、镁、锌、硒、铁、铜和锰含量分别为10500 mg/kg、936.67 mg/kg、2635 mg/kg、18.80 mg/kg、0.005 mg/kg、188 mg/kg、7.43 mg/kg和35.20 mg/kg。氨基酸总含量4.85%;箭叶橐吾粗蛋白、粗脂肪、和粗纤维含量分别为7.40%、2.10%和25.50%。矿物质元素钙、磷、镁、锌、硒、铁、铜和锰含量分别为11700 mg/kg、1413.33 mg/kg、2895 mg/kg、19.25 mg/kg、0.022 mg/kg、428 mg/kg、6.77 mg/kg和40.15 mg/kg。含17种氨基酸,总含量5.06%;盘状橐吾粗蛋白、粗脂肪和粗纤维含量分别为10.80%、2.70%和25.50%。矿物质元素钙、磷、镁、锌、硒、铁、铜和锰含量分别为14150 mg/kg、1265mg/kg、2730 mg/kg、37.30 mg/kg、0.0025 mg/kg、165 mg/kg、6.39 mg/kg和77.55 mg/kg。氨基酸总含量8.84%。结果表明4种橐吾属植物具有一定的营养价值,矿物质元素较为丰富,氨基酸种类比较齐全,尤其是盘状橐吾、箭叶橐吾和黄帚橐吾粗蛋白高于5%以上,具有饲草化利用的潜力。
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