鱿鱼肝脏鱼油抗衰老及预防肝损伤功能评价

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鱿鱼肝脏鱼油富含以EPA和DHA为主的多不饱和脂肪酸,具有抗炎、抗肿瘤、抗血栓等多种生理功效。本文以鱿鱼肝脏鱼油为研究对象,测定其基本理化指标评价鱼油的品质。在体外化学体系中测定各自由基的清除能力,并构建D-半乳糖诱导衰老小鼠模型和CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型,测定模型动物小鼠血清中相关酶的活性,观察组织病理切片的变化,评价鱿鱼肝脏鱼油抗衰老及预防肝损伤的效果,并测定相关血清细胞因子的含量及在mRNA和蛋白水平上的基因表达量,从分子生物学层面揭示鱿鱼肝脏鱼油的功能性作用机制。本文研究结果如下:(1)对鱿鱼肝脏鱼油的基本理化指标进行测定,用GC-MS法测定鱼油中游离脂肪酸的成分并进行分析,在纯化学体系中测定鱿鱼肝脏鱼油体外抗氧化能力,实验结果显示:水分及挥发性物质、过氧化值、碘值、皂化值指标均达到鱼油二级标准,品质良好;鱿鱼肝脏鱼油中游离脂肪酸种类较多,多不饱和脂肪酸含量达到42.16%,其中EPA和DHA的含量为23.53%;鱿鱼肝脏鱼油富含多不饱和脂肪酸,体外抗氧化能力强。(2)通过构建D-半乳糖诱导衰老小鼠模型,以小鼠脏器指数、肝脏和皮肤病理切片,血清中SOD、CAT、MDA、GSH-PX、T-AOC的活性和含量,血清细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α的含量以及SOD1、SOD2、CAT、GSH在mRNA和蛋白水平上的表达为指标,综合评价鱿鱼肝脏鱼油对D-半乳糖诱导衰老小鼠模型的抗衰老效果与作用机制。结果表明,鱿鱼肝脏鱼油在一定程度上可以缓解小鼠心脏、肝脏、脾脏和肾脏指数的降低,延缓小鼠脏器器官的退化;与模型组相比,可以显著提高SOD、CAT、GSH-PX和T-AOC的活性,降低MDA的生成;有效缓解肝脏和皮肤组织病理症状,达到抗衰老的效果。此外,鱿鱼肝脏鱼油富含多不饱和脂肪酸,它可以通过降低氧化应激反应、显著降低炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α的含量,提高SOD1、SOD2、CAT和GSH在mRNA和蛋白水平上的表达量,从分子生物学水平揭示鱿鱼肝脏鱼油抗衰老的作用机制。(3)构建CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型,以小鼠脏器指数、肝脏病理切片、血清中ALT、AST、TG、GSH-PX、MDA的含量和细胞炎症因子IFN-γ、IL-6、IL-12、TNF-α的含量以及肝脏组织中COX-2、iNOS、NF-κB和IκBa在mRNA和蛋白水平上的表达量为指标,评价鱿鱼肝脏鱼油对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的预防效果与作用机制。本实验结果表明,鱿鱼肝脏鱼油可缓解小鼠肝脏、脾脏和肾脏指数的升高、改善肝脏病理症状,与模型组相比,显著降低血清中AST、ALT、MDA、TG、IFN-γ、IL-6、IL-12和TNF-α含量,升高GSH-PX的含量,达到预防肝损伤的效果。鱿鱼肝脏鱼油中的多不饱和脂肪酸,可降低多核细胞和中性粒细胞对化学趋化物(如白三烯B4)的趋化性,使细胞迁移数量减少,达到抑制炎症的作用,且EPA和DHA能有效抑制NF-κB p65途径的磷酸化激活,使炎性因子表达量减少。此外,在mRNA和蛋白水平上能够有效防止IκBa的降解,抑制NF-κB p65途径的磷酸化激活,并可显著降低肝脏组织中COX-2、iNOS的表达量,具有很好的抗炎效果,对肝损伤有一定的预防作用。
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