论文部分内容阅读
目的 探讨结扎坐骨神经是否引起脊髓神经元凋亡及弥可保对神经源性痛大鼠脊髓神经元凋亡和疼痛的影响。方法 成年雄性Wistar大鼠66只,体重230～250g。腹腔注射7%水合氯醛6ml/kg麻醉后,分离左侧坐骨神经,用4-0丝线结扎坐骨神经建立神经源性痛模型。将大鼠随机分为三组:①结扎坐骨神经+生理盐水组(NS组,n=30);②弥可保组(M组,n=30):结扎坐骨神经后向腹腔注入弥可保600μg/kg·d;③假手术对照组(C组,n=6):仅暴露坐骨神经而不结扎。术前、术后6小时、1天、3天、7天及14天分别进行行为学测定,记录缩爪及尾弹时间。各组分别取脊髓组织,以病理学改变作为评价脊髓损伤的指标;应用免疫组织化学S-P法和图象分析系统检测脊髓中肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的表达,采用原位末端标记(TUNEL)法观察脊髓神经元凋亡。结果 脊髓组织病理形态学变化:HE和尼氏染色镜检发现M组脊髓组织病理学改变明显轻于NS组。免疫组化检测TNF-α和IL-6的表达:NS组大鼠坐骨神经损伤后TNF-α表达迅速增强,在损伤后6小时开始表达,1天达高峰,并于术后14天恢复到基线水平,IL-6于结扎后1天开始表达,术后3天达峰值并持续到术后7天,而后慢慢降低(P<0.01);M组大鼠脊髓TNF-α和IL-6表达在相应时间点都明显低于NS组,M组和NS两组间比较差异性显著(P<0.05);M组和NS组大鼠脊髓中TNF-α和IL-6表达在相应时间点都明显高于C组,组间比较差异性显著(P<0.05)。原位末端标记(TUNEL)法检测脊髓凋亡细胞:NS组在术后6小时及1天可见少量标记的阳性细胞,并于术后3天达到高峰,损伤后7天仍可见较多阳性细胞表达,术后14天则仅有少量表达;M组大鼠脊髓中阳性神经细胞明显少于NS组,高峰发生在损伤后3天,以后逐渐降低,两组间比较有显著性差异(P<0.01)。行为学测定:NS组和M组大鼠存在机械性痛觉超敏和热诱发的持续性疼痛,与C组相比较差异十分显著(p<0.01);M组在术后3天疼痛开始慢慢缓解,与NS组比较有显著性(p<0.01)。