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高血压是最常见的慢性心血管疾病，严重的高血压可引起心、脑、肾等多种靶器官的损害，控制高血压是防治心脑血管疾病的关键。因此，研发高效、安全的抗高血压药十分必要。钾通道在血管平滑肌上分布广泛，KCNQ基因编码的电压依赖型钾离子通道(Kv7)可以有效地调控血管平滑肌的舒缩。QO-58属吡唑并嘧啶酮类化合物，具有开放Kv7钾离子通道的作用。本研究拟观察QO-58对SD大鼠离体小动脉血管张力的影响以及对自发性高血压大鼠血压和心率的影响，并进一步探讨其作用机制，为高血压的治疗提供理论和实验依据。一、新型钾通道开放剂QO-58对SD大鼠离体小动脉血管张力的影响目的：观察QO-58对大鼠肠系膜小动脉、肾脏小动脉、基底动脉和冠状动脉血管张力的影响，并探讨其作用机制。方法：采用微血管张力测定仪记录大鼠离体肠系膜小动脉、肾脏小动脉、基底动脉和冠状动脉在氯化钾（KCl）或新福林（PHE）预收缩时QO-58对血管张力的影响，并与硝苯地平的舒血管作用相比较，此外，还观察Kv7通道阻断剂XE991对QO-58作用的影响。采用实时定量PCR方法检测SD大鼠肠系膜小动脉、肾小动脉、基底动脉和冠状动脉血管KCNQ4RNA的含量。结果：1QO-58对肠系膜小动脉血管的舒张作用QO58在1μmol/L~300μmol/L范围内浓度依赖性地舒张60mmol/LKCl预收缩以及60mmol/L KCl和10μmol/L XE991共同预收缩的肠系膜小动脉，EC50分别为（19.1±1.0）μmol/L、（18.4±3.1）μmol/L，二者无统计学差异（P>0.05）。给予XE991后100μmol/L、300μmol/L QO-58的舒血管作用与未加入XE991相比明显降低（P<0.01，P <0.05），提示XE991可降低QO-58扩血管作用的效能。QO58在1μmol/L~100μmol/L范围内浓度依赖性地舒张10μmol/LPHE预收缩以及10μmol/L PHE和10μmol/L XE991共同预收缩的肠系膜小动脉，EC50分别为（3.3±0.3）μmol/L、（5.77±0.25）μmol/L，二者相比有明显差异（P<0.05）；给予XE991后1μmol/L、3μmol/L QO-58的舒血管作用与未加入XE991相比明显降低（P<0.01）且量效曲线右移，提示XE991可降低QO-58扩血管作用的效价强度。QO58在1μmol/L~300μmol/L范围内浓度依赖性地舒张120mmol/LKCl预收缩的肠系膜小动脉，EC50为（17.97±1.58）μmol/L，与60mmol/LKCl预收缩的EC50（19.1±1.0）μmol/L相比，无明显差异（P>0.05），但是30μmol/L、100μmol/L、300μmol/L QO-58的血管舒张率与60mmol/LKCl预收缩相比明显降低（P <0.01，P <0.05），提示增加细胞外K+浓度，提高K+平衡电位，抑制QO-58扩血管作用。QO58舒张60mmol/L KCl预收缩的肠系膜小动脉的量效曲线与10μmol/L PHE预收缩相比明显右移（P <0.01），提示细胞外高K+，可减弱QO-58扩血管作用。硝苯地平在1×10-4μmol/L~10μmol/L范围内浓度依赖性地舒张60mmol/L KCl预收缩的肠系膜小动脉，EC50为（3.5±0.4）nmol/L，与QO-58相比明显减小（P<0.01），硝苯地平舒张肠系膜小动脉的效价强度大于QO-58。2QO-58对肾脏小动脉血管张力的舒张作用QO58在1μmol/L~300μmol/L范围内浓度依赖性地舒张60mmol/LKCl预收缩以及60mmol/L KCl和10μmol/L XE991共同预收缩的肾脏小动脉，EC50分别为（55.0±21.7）μmol/L、（56.3±5.0）μmol/L。给予XE991后10、30、300μmol/L QO-58的舒血管作用与未加入XE991相比明显降低（P <0.05），量效曲线右移，提示XE991可降低QO-58扩血管作用的效能。QO58在1μmol/L~100μmol/L范围内浓度依赖性地舒张1μmol/L PHE预收缩以及1μmol/L PHE和10μmol/L XE991共同预收缩的肾脏小动脉，EC50分别为（6.25±1.04）μmol/L、（23.4±1.19）μmol/L，给予XE991后1μmol/L、3μmol/L、10μmol/L、30μmol/L、100μmol/L QO-58的舒血管作用与未加入XE991相比明显降低（P <0.01）；其量效曲线明显右移，提示XE991可降低QO-58舒张肾脏小动脉的作用的效能和效价强度。QO58对60mmol/L KCl预收缩的肾脏小动脉的舒张量效曲线，与10μmol/L PHE预收缩相比明显右移（P <0.01），提示细胞外高K+，可减弱QO-58扩血管作用。QO58在1μmol/L~100μmol/L范围内可浓度依赖性地舒张1μmol/LPHE预收缩的自发性高血压大鼠的肾脏小动脉，EC50为（5.28±0.78）μmol/L，与SD大鼠EC50（6.25±1.04）μmol/L相比，明显降低（P<0.05）。提示QO58对SHR更敏感。硝苯地平在1×10-4μmol/L~10μmol/L范围内浓度依赖性地舒张1μmol/L PHE预收缩的肾脏小动脉，EC50为（38.0±2.6）nmol/L，与QO-58相比明显减小（P<0.01），硝苯地平舒张肾脏小动脉的效价强度大于QO-58。3QO-58对脑基底动脉血管的舒张作用QO58在1μmol/L~100μmol/L范围内浓度依赖性地舒张60mmol/LKCl预收缩以及60mmol/L KCl和10μmol/L XE991共同预收缩的基底动脉，EC50分别为（26.4±3.4）μmol/L、（26.4±0.6）μmol/L；给予XE991后3、10μmol/L QO-58的舒血管作用与未加入XE991相比明显降低（P<0.05），提示XE991可抑制QO-58的舒血管作用。硝苯地平在1×10-4μmol/L~10μmol/L范围内浓度依赖性地舒张60mmol/L KCl预收缩的基底动脉，EC50为（12.6±3.6）nmol/L，与QO-58相比明显减小（P <0.01），硝苯地平舒张基底动脉的效价强度大于QO-58。4QO-58对冠状动脉血管张力的影响QO58在10μmol/L~1mmol/L范围内浓度依赖性地舒张60mmol/L KCl预收缩以及60mmol/L KCl和10μmol/L XE991共同预收缩的冠状动脉，EC50分别为（105.8±0.7）μmol/L、（107.0±5.2）μmol/L；给予XE991后300μmol/L和1mmol/L QO-58的舒血管作用与未加入XE991相比明显降低（P <0.05），提示XE991可抑制高浓度QO-58舒张冠状动脉作用。硝苯地平在1×10-4μmol/L~1×10-1μmol/L范围内浓度依赖性地舒张60mmol/L KCl预收缩的冠状动脉，EC50为（6.39±0.34）nmol/L，与QO-58相比明显减小（P <0.01），硝苯地平舒张冠状动脉的效价强度大于QO-58。5比较SD大鼠肠系膜小动脉、肾小动脉、基底动脉和冠状动脉血管KCNQ4RNA的含量与SD大鼠冠状动脉KCNQ4mRNA（Ct为11.21±0.27）相比，肠系膜小动脉、肾脏小动脉、基底动脉KCNQ4mRNA明显增多（P <0.01，P<0.05）， Ct值分别为9.29±0.29；9.48±0.72；10.42±0.40。KCNQ4mRNA的含量：肠系膜小动脉>肾脏小动脉>基底动脉>冠状动脉，此结果与QO58扩张上述血管的效价强度一致，再次证明QO58扩血管作用与开放Kv7.4钾离子通道有关。结论：QO-58可浓度依赖性地扩张预收缩的SD大鼠肠系膜小动脉、肾脏小动脉、基底动脉和冠状动脉，其扩血管作用与开放Kv7钾通道有关。二、新型钾通道开放剂QO-58对自发性高血压大鼠血压和心率的影响目的：观察QO-58对自发性高血压大鼠（SHR）血压和心率的影响。方法：实验分为10组：其中SHR分为9组，分别为QO-581.25mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg组、QO-581.25mg/kg+硝苯地平1mg/kg组、QO-582.5mg/kg+硝苯地平1mg/kg组、阳性对照硝苯地平1mg/kg组和瑞替加滨5mg/kg组、溶剂对照组；SD大鼠QO-585mg/kg组。采用单次静脉注射给药方式，应用无创鼠尾血压测定方法，观察QO-58对SHR和SD大鼠血压和心率的影响。结果：1QO-58对心率的影响与给药前相比，QO582.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg可剂量依赖性地减慢SHR心率（P <0.05, P <0.01）；硝苯地平1mg/kg明显加快心率；瑞替加滨5mg/kg明显减慢心率（P <0.01）；溶剂组给药前后心率无明显差异（P>0.05）。QO-585mg/kg对SD大鼠心率无明显影响（P>0.05），提示QO-58可降低SHR的心肌耗氧量，从而保护心脏。以△心率=给药后心率-给药前心率作为观察指标，与溶剂对照组（-7.3±7.3）次/分相比，QO-585mg/kg组和瑞替加滨5mg/kg组心率明显减慢（P <0.01）,△心率分别为（-56.6±9.2）次/分和（-67.4±11.7）次/分；硝苯地平1mg/kg组心率明显加快（P <0.05），△心率为（18.4±4.7）次/分；QO-581.25mg/kg、2.5mg/kg、10mg/kg有减慢心率的趋势，但无统计学意义（P>0.05）。与硝苯地平组相比，硝苯地平分别与QO-581.25mg/kg和2.5mg/kg合用，可使心率加快的作用有所减弱，但无统计学差异（P>0.05）。2QO-58对收缩压的影响与给药前相比，QO-58可剂量依赖性地降低SHR收缩压；瑞替加滨5mg/kg和硝苯地平1mg/kg、QO-581.25mg/kg与硝苯地平1mg/kg合用、QO-582.5mg/kg与硝苯地平1mg/kg合用均可明显降低SHR收缩压（P<0.01）；溶剂对照组对SHR收缩压无明显影响（P>0.05）；QO-585mg/kg对SD大鼠收缩压无明显影响（P>0.05）。以△收缩压=给药后收缩压-给药前收缩压作为观察指标，与溶剂对照组（-0.3±2.6）mmHg相比，QO-582.5mg/kg和10mg/kg、QO-581.25mg/kg与硝苯地平合用、QO-582.5mg/kg与硝苯地平合用、阳性对照药硝苯地平、瑞替加滨均可明显降低SHR收缩压（P <0.05，P <0.01），△收缩压分别为(-21.5±5.1) mmHg、(-20.8±2.6) mmHg、（-22.9±5.3）mmHg、（-25.5±4.7）mmHg、（-32.2±6.4）mmHg、（-38.8±4.5）mmHg；QO-581.25mg/kg和5mg/kg有降低收缩压趋势，但无统计学差异（P>0.05）。3QO-58对SHR舒张压的影响与给药前相比，QO-585mg/kg和10mg/kg、瑞替加滨5mg/kg、硝苯地平1mg/kg、硝苯地平1mg/kg与QO-581.25mg/kg合用、硝苯地平1mg/kg与QO-582.5mg/kg合用均可明显降低SHR的舒张压（P <0.05，P<0.01）；QO-581.25mg/kg和2.5mg/kg、溶剂对SHR舒张压无明显影响（P>0.05）。QO-585mg/kg对SD大鼠舒张压无明显影响（P>0.05）。以△舒张压=给药后舒张压-给药前舒张压作为观察指标，与溶剂对照组（-3.4±2.8）mmHg相比，QO-5810mg/kg、瑞替加滨5mg/kg、硝苯地平1mg/kg可明显降低SHR舒张压（P <0.05，P <0.01），△舒张压分别为（-28.2±5.3）mmHg、（-46.2±6.4）mmHg、（-29.5±5.9）mmHg；其余各组与溶剂组相比无明显差异（P>0.05）。结论：静脉注射QO-58可剂量依赖性地减慢SHR心率，降低收缩压和舒张压，对SD大鼠心率、收缩压和舒张压无明显影响，提示QO-58具有抗高血压和保护心脏的作用。