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随着人们食品安全意识的不断增强,微生态制剂以其天然、安全、无残留等优点逐渐代替抗生素作为饲料添加剂,已得到饲料行业的广泛认可。而芽孢杆菌由于具有天然强抗逆性、耐高温、耐酸碱、易贮存等特殊性质,成为国内外研究的热点。本研究通过试验研制出枯草-地衣-纳豆三联芽孢杆菌活菌制剂,对于微生态制剂的工业化生产及断奶仔猪饲养中的应用具有重要实践意义。本研究将枯草芽孢杆菌(BS)、地衣芽孢杆菌(DY)、纳豆芽孢杆菌(NT)3株芽孢杆菌进行联合培养,得到三联菌(TRI)培养液,其中4种饲料酶活性依次为：蛋白酶126.72 U／mL,淀粉酶31.31 U／mL,纤维素酶1.77 U／mL,β-甘露聚糖酶2.42 U／mL。并对3株菌进行菌落形态、细胞特征及生理生化特征鉴定。通过正交试验及单因素试验,优化得到了三联芽孢杆菌发酵的最优培养基组成配比：1%(v／v)废糖蜜、0.5%(w／v)豆粕粉、0.3%(w／v)氯化钙及最适发酵条件：起始pH7.5,接种量5%(v／v),装液量10～30%(v／v),培养温度34℃,培养时间20 h；利用工业生产剩余物废糖蜜、豆粕粉作为碳、氮源,从根本上降低了生产成本。在优化培养基的基础上添加5%(w／v)麸皮并在培养结束后将发酵液静置处理48 h,可提高三联芽孢杆菌的产芽孢率,达96.2%以上。经检测,三联芽孢杆菌制剂对高温、模拟猪胃肠道溶液的耐受性良好,在加有保护剂[5%(w／v)葡萄糖溶液]、-7℃(冷冻)条件下,90 d后活菌数量仍保持在109 cfu/g水平,存活率达21.49%。三联芽孢杆菌经5 t水平的中试发酵生产,发酵液离心后菌泥活性高达9.0×1012 cfu／g,活菌制剂菌粉的活性达4.5×1010 cfu/g.仔猪饲养试验结果表明,三联芽孢杆菌制剂使断奶仔猪日增重提高了20.72%(P>0.05),料重比降低12.36%(P<0.05),腹泻率降低22.73%(P>0.05),对饲料利用率有所提高,并可明显提高经济效益。综上所述,本研究制备的三联芽孢杆菌活菌制剂成本低,稳定性好,经济效益高,其作为饲料添加剂在仔猪生产上的应用前景将十分广阔。