硼替佐米联合依托泊苷对Hut-78细胞株表达NF-κB P65 mRNA的影响

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:she002ying
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目的:检钡怀同浓度硼替佐米(BTZ)联合依托泊苷(VP16),作用于人皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)Hut-78细胞株前后,NF-κB P65 mRNA水平表达的情况及其相关关系,探讨BTZ联合VP16的抗肿瘤作用,旨在为临床治疗CTCL提供更确切的理论基础。方法:通过细胞培养技术对CTCL细胞株Hut78细胞进行传代培养,以2、5、10、50、100nom/L浓度的BTZ及42.5、170、340、680、1360、1700umol/L浓度的VP16单药及联合作用于Hut78细胞24h及48h,采用SYBRgreen I RT-PCR方法检测各组Hut-78细胞中NF-κB P65 mRNA的表达情况,并进行相关性分析。结果:1、一定浓度BTZ作用于Hut-78细胞株(24-48h)内,与对照组相比,随着时间的延长及浓度的增加,NF-κB P65 mRNA的表达水平均降低,P<0.05;2、一定浓度VP16作用于Hut-78细胞株(24-48h)内,随着时间的延长及浓度增加,NF-κB P65 mRNA的表达量先降低后升高。当VP16浓度为42.5umol/L时,其表达水平明显低于对照组(P<0.05),之后浓度呈上升趋势。当VP16浓度为1360umol/L及1700umol/L时,NF-κB P65 mRNA的48h表达量明显升高,P<0.05。3、一定浓度BTZ及VP16联合作用于Hut-78细胞株的NF-κB P65 mRNA水平:(1)各浓度的BTZ联合VP16作用于Hut-78细胞株,24h及48h后,随着浓度增加,与对照组相比,NF-κB P65 mRNA的表达量均降低,P<0.05。(2)各浓度的BTZ联合VP16作用于Hut-78细胞株,24h与48h小时相比,药物浓度低于50nom/L的BTZ联合1360umol/L的VP16组时,其48h表达量高于24h表达量,而药物浓度高于该组时其48h表达量低于24h表达量。(3)与VP16单药组相比,在作用于Hut-78细胞株24h、48h后,随着联合用药浓度增加,NF-κB P65 mRNA的表达量呈下降趋势且低于VP16单药作用组。(4)与BTZ单药组相比,联合作用于Hut-78细胞株后,随着联合用药浓度增加,NF-κB P65 mRNA的表达量呈下降趋势,24h后联合作用表达量有低于BTZ单药组的趋势,而48h后联合作用表达量均高于BTZ单药组。结论:1.在Hut78细胞系中,BTZ浓度为2nmol/L作用时,即可下调其NF-κB P65 mRNA水平;2.在Hut78细胞系中,VP16浓度为42.5umol/L作用时,其表达水平降低,之后NF-κB P65 mRNA水平呈上升趋势,高浓度VP16可以激活NF-κB P65 mRNA的表达,且随着时间的延长,NF-κB P65 mRNA的表达增加;3.在Hut78细胞系中,BTZ及VP16联合用药达一定时间及一定浓度时,BTZ可以抵消由于VP16激活的NF-κB P65 mRNA的表达,且高浓度的BTZ对VP16激活的NF-κB P65 mRNA的抵消作用较强。
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