【摘 要】
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该实验通过体外培养处于分泌前期的人乳牙牙胚,建立人牙胚的体外器官培养模型.应用此模型组织学观察中低浓度(25mg/l和10mg/l)的氟对人牙胚细胞增殖分化的影响,并采用免疫组
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该实验通过体外培养处于分泌前期的人乳牙牙胚,建立人牙胚的体外器官培养模型.应用此模型组织学观察中低浓度(25mg/l和10mg/l)的氟对人牙胚细胞增殖分化的影响,并采用免疫组化染色和图像分析技术观察细胞增殖周期调控蛋白CDK<,4>、CyclinD<,1>和PCNA在分泌前期牙胚中的表达、检测氟对其在内釉上皮细胞表达的影响,从细胞增殖方面探讨氟对分泌前期牙胚细胞毒性作用的可能机制,为氟斑牙的研究提供新的思路,为其防治提供理论依据.该实验组织学观察到每个浓度的氟存在时牙胚的发育均延缓,尤其内釉上皮细胞增殖分化程度明显较对照组幼稚.表明氟存在的毒性作用,抑制了牙胚细胞尤其是内釉上皮细胞的增殖,延缓其进入终末分化.免疫组化染色结果显示CDK<,4>、CyclinD<,1>和PCNA在分泌前期牙胚细胞增殖区域均有阳性表达,且表达模式相一致.表明CDK<,4>、CyclinD<,1>和PCNA参与了牙胚发育过程,在调控牙胚细胞增殖过程中发挥积极作用.图像分析显示10mg/lF各时段组,牙胚内釉上皮细胞中CDK<,4>、CyclinD<,1>和PCNA的蛋白含量均明显低于照组(P<0.01).表明氟明显抑制了CDK<,4>、CyclinD<,1>和PCNA在内釉上皮细胞表达,提示氟化物可能通过抑制细胞增殖周期调控蛋白CDK<,4>、CyclinD<,1>和PCNA的表达而抑制成釉细胞的增殖分化,从而影响成釉器的发育.
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