鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。自30年代在美国爆发以来,现已成为世界各地流行的重要禽病。IBV是单股RNA病毒,该病毒基因可因点突变和重组而发生变异,故传染性支气管炎病毒血清型较多。已知的血清型有以侵害呼吸道为主的Conn、Iowa97、JMK、Florida、Arkansas99等和以侵害肾脏为主的M41、Holte、Gray、Australia“T”等30余种。Gough等(Gough et al,1992)报道了英国一种新的793/B血清型的IBV,该毒株和其它血清型传支毒株之间无交叉血清学关系;其免疫原基因S1的序列与欧洲17个传支毒株之间差异高达21～25%。2003年刁有祥、杨杰华等从山东省某蛋鸡饲养场产蛋异常下降鸡群中分离到一株793/B传染性支气管炎毒株,命名为TA03株。目前,该血清型IBV在西班牙、德国、荷兰、中国、意大利、泰国等国均有发生和流行,对养鸡业危害较大。根据GenBank中已经发表的IBV N基因的保守序列,设计合成一对引物,利用RT-PCR技术扩增IBV N基因的582 bp的核酸片段,并制备出地高辛标记的IBV核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与不同毒株的IBV核酸发生特异性杂交,而与对照的NDV、鹅副粘病毒的核酸杂交反应为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对IBV的最低检出量为10 pg,显示所制备的核酸探针用于IBV的检测是可行的。参照GenBank已经发表的793/B和多株IBV的N基因和S1基因,设计两对引物,对样品的核酸模板进行扩增,建立了一种能够同时检测鸡传染性支气管炎病毒和鉴定出793/B血清型的双重RT-PCR方法。该方法对793/B血清型可检测到582bp和891bp两条核酸片断,其他的血清型只出现582bp一条核酸片断,而新城疫病毒、传染性喉气管炎、鹅副粘病毒菌未检测到特异型条带。该方法简化了聚合酶链式反应程序和缩短了检测时间。根据Genbank已经发表的传染性支气管炎病毒(IBV)N全基因组序列设计引物,对IBV 793/B分离毒株N基因进行克隆与序列分析。结果表明,IBV 793/B的N基因由1229bp组成,与Genbank已发表的11株IBV的N基因相比较,IBV 793/B的N基因共有88处点突变,在第991位发生了一个核苷酸的缺失。N基因的核苷酸同源性为86.9～91.4%,氨基酸同源性为75.8～77.5%。表明IBV 93/B的N基因存在着较大的变异性。