目的：　　N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V（GnT-V）催化形成β1,6-GlcNAc糖支链结构。一般情况下，GnT-V被认为是细胞迁移和侵袭的促进因子。N-乙酰氨基葡萄糖转移酶III（GnT-III）催化形成平分型糖支链结构（bisecting GlcNAc, bis-GlcNAc），GnT-III则通常被认为是肿瘤细胞迁移和侵袭的抑制因子，且GnT-III的过表达能够抑制GnT-V的功能。有研究证实GnT-V及其产物β1,6-GlcNAc糖支链的表达以及GnT-V的酶活性在正常妊娠前三个月胎盘中显著高于后三个月妊娠胎盘。并且，GnT-V能够通过整合素α5β1进行糖基化修饰来调控绒毛膜癌细胞的侵袭，表明GnT-V在早期妊娠胎盘形成中发挥了重要作用。但是GnT-V和GnT-III在早期妊娠和自然流产中是否存在作用差异，目前还未见报道。本研究从临床标本入手，通过检测早期正常妊娠和自然流产绒毛组织中GnT-V和GnT-III的mRNA（MGAT5和MGAT3）和蛋白表达水平、分析两种糖基转移酶产物β1,6-GlcNAc和bisecting GlcNAc糖支链的表达定位、测定GnT-V和GnT-III酶活性以及确定GnT-V和GnT-III作用的靶蛋白，初步探讨N-乙酰氨基葡萄糖转移酶在早期妊娠中的作用机制，为早期自然流产的临床诊治提供新的研究思路。　　方法：　　1.标本收集：①正常妊娠组：收集人正常孕第6-9周妊娠绒毛标本60例（孕6、7、8、9周妊娠各15例）；②早期自然流产组（early spontaneous miscarriage, ESM）：收集孕第6-9周自然流产绒毛标本，共40例（孕6、7、8、9周妊娠各10例）。　　2.运用real time PCR、Western blot分别检测GnT-V和GnT-III在正常妊娠组和ESM组绒毛组织中的mRNA（MGAT5和MGAT3）和蛋白质表达；　　3.采用免疫荧光和 lectin fluorescence分别检测 GnT-V和GnT-III、其产物β1,6-GlcNAc糖支链和bisecting GlcNAc糖支链在正常妊娠组和ESM组绒毛中的定位；　　4.通过ELISA方法，检测GnT-V和GnT-III在正常妊娠组和ESM组绒毛中的酶活性；　　5.采用免疫共沉淀技术确定GnT-V和GnT-III作用的靶蛋白。　　结果：　　1.在正常妊娠绒毛组织中，GnT-V的mRNA（MGAT5）和蛋白表达水平及其产物β1,6-GlcNAc糖支链的表达均在孕第9周最高（P<0.05），GnT-V的酶活性与其表达一致。GnT-V主要定位于绒毛合体滋养层细胞（STB）和细胞滋养层细胞（CTB）的细胞质，β1,6-GlcNAc糖支链主要定位于STB和CTB的细胞表面。　　2.在ESM组中，各孕周GnT-V的mRNA（MGAT5）和蛋白表达水平及其产物β1,6-GlcNAc糖支链的表达均显著低于正常妊娠组（P<0.05）。　　3.在孕6-9周正常妊娠绒毛组织中，GnT-III（MGAT3）的mRNA和蛋白表达水平及其产物bis-GlcNAc糖支链的表达在孕第6周最高（P<0.05），GnT-III的酶活性与其表达一致。GnT-III主要定位于STB的细胞质，而在CTB中的表达较弱，bis-GlcNAc糖支链主要定位于STB的细胞表面，而在CTB中的表达较弱。　　4.在ESM组中，各孕周GnT-III的mRNA（MGAT3）和蛋白表达水平及其产物bis-GlcNAc糖支链的表达均显著高于正常妊娠组（P<0.05）。　　5.正常妊娠组中GnT-V的酶活性显著高于ESM组（P<0.05），而GnT-III的酶活性则明显低于ESM组（P<0.05）。　　6.在 ESM组中，各孕周的整合素α5亚基表面的β1,6-GlcNAc糖支链和bis-GlcNAc糖支链的表达与正常妊娠组比较均没有显著变化（P>0.05）；但整合素β1亚基表面的β1,6-GlcNAc糖支链的表达均低于正常妊娠组（P<0.05），并且其表面的bis-GlcNAc糖支链均高于正常妊娠组（P<0.05）。　　结论：　　1. GnT-V和GnT-III及其产物的表达，以及它们的酶活性在早期正常妊娠（孕6-9周）中存在着一定的动态平衡规律，提示GnT-V和GnT-III在参与调控早期妊娠过程中发挥着一定的重要作用，早期自然流产的发生可能与GnT-V和GnT-III的异常表达相关。　　2. ESM组中整合素β1上异常的β1,6-GlcNAc和bisecting GlcNAc糖支链表达证实GnT-V和GnT-III可通过对整合素β1的糖基化作用参与调控早期自然流产。