HMGAl在甲状腺癌细胞中对E-cadherin表达的调控作用及机理初步研究

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目的:明确甲状腺癌细胞中HMGA1对E-cadherin表达的调控作用及其机制;探讨HMGA1对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:Western blot观察SW579细胞中沉默HMGA1对E-cadherin蛋白表达的调控作用;PCR扩增E-cadherin启动子活性序列,构建E-cadherin启动子荧光素酶报告基因载体,分别转染至TPC-1、SW579细胞中,以荧光素酶报告系统分析检测HMGA1表达载体对E-cadherin启动子活性的影响;应用Transwell实验观察HMGA1对SW579细胞侵袭能力的影响。结果:1)Western blot显示:与空白组、scramble RNA组比较,HMGA1蛋白表达水平均下降,E-cadherin蛋白表达水平均增加,以160nmol/L组变化幅度最明显(p<0.05)。2)成功构建E-cadherin启动子荧光素酶报告基因载体,应用相对荧光素酶活性测定发现在SW579细胞中,与pGL4.10-E-cadherin组比较,HMGA1表达载体组的E-cadherin启动子活性均下降,以1μg、2μg组下降幅度明显(p<0.05);TPC-1细胞中,与空白组比较,HMGA1表达载体组的E-cadherin启动子活性均下降,以2μg组下降幅度最明显(p<0.05)。3)Transwell实验显示:与空白组、scramble RNA组比较,沉默HMGA1后穿透膜的SW579细胞数明显下降(p<0.05)。结论:1)在甲状腺癌细胞中,HMGA1可通过下调E-cadherin启动子的活性负调控E-cadherin的表达;2)SW579细胞中,HMGA1可增加细胞侵袭能力。
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